甲酸处理对微藻油脂提取的影响.pdfVIP

V01．36 高等 学校 化 学 学报 No．3 2015年 3月 CHEMICALJOURNALOF CHINESEUNIVERSITIES 499～5O4 doi：10．7503／cjc 甲酸处理对微藻油脂提取的影响 王松梅，关鼎耀，杜 伟，赵雪冰，刘德华 (清华大学化工系，北京 100084) 摘要 采用易于回收的有机酸处理微藻细胞 ，以微藻 Chlorellaprotothecoides为原料，系统研究 了甲酸处理对 微藻油脂提取的影响．结果表明，甲酸能有效破碎微藻细胞，最终油脂得率和脂肪酸甲酯(FAME)得率均与 传统无机酸热法相当．甲酸浓度 、温度和处理时间对油脂提取有显著影响．当甲酸浓度为88％，液固比为 6mL／g，100oC下处理30min，Chlorellaprotothecoides油脂得率为49．2％，FAME得率高达92．1％．甲酸处理 提取到的微藻油脂脂肪酸组成与无机酸热法结果无明显区别．ChloreUaprotothecoides油脂主要含有5种脂肪 酸 ，其中C18：1含量最高．实验还考察了甲酸处理对Nannochlorumsp和Nannochloropsisoceanic的适用性，结 果表明，对于不同微藻原料 ，甲酸处理提取到的微藻油脂得率和FAME得率均与无机酸热法结果相当． 关键词 微藻；甲酸；油脂提取；生物柴油 中图分类号 069 文献标志码 A 微生物具有生产周期短，不 占用耕地等优势，其油脂可作为生产生物柴油的原料，近年来备受关 注 ．zJ．微藻能够通过光合作用固定二氧化碳 ，适应各种各样的种植条件 ，是一种非常有前景的生物柴 油原料_3曲j．对微藻油脂进行有效提取是促进微藻油脂在生物柴油制备中应用的关键．大部分微藻细 胞存在细胞壁，在微藻油脂提取前常常需要对细胞进行破碎处理，以加快微藻细胞 内油脂的释放 J． 传统的细胞破碎方法主要包括机械破碎法和非机械破碎法 ．机械破碎法包括研磨法、超声破碎法、 球磨法及微波法等 J，非机械破碎法包括酶解法、渗透压法和化学法等¨ ．在这些方法中，机 械破碎法油脂得率相对较低且不具有普遍适用性 川 ，无机酸热法则显示出较好 的细胞破碎效 果 1【4,15]．然而，无机酸热法中盐酸使用量大，且无机酸难以回收，容易对环境造成污染，难 以进行工 业化推广．目前亟待开发新的微藻细胞处理技术 以促进微藻油脂在生物柴油制备中的应用． 本文尝试采用易于回收的有机酸处理微藻细胞．有机酸酸性弱于无机酸，对设备要求相对较低 ， 并且易于回收，在预处理木质纤维原料方面有大量研究报道 ．然而，有机酸在破碎微藻细胞提取 油脂方面尚未见报道．常用的有机酸包括 甲酸和乙酸等，与乙酸相比，甲酸更容易通过简单蒸馏回 收_2．首先对比研究了传统细胞破碎方法与甲酸处理对 Chlorellaprotothecoides微藻油脂提取的影响． 在此基础上，进一步研究了甲酸浓度、温度、处理时间和液固比等因素对微藻油脂得率和脂肪酸 甲酯 (FAME)得率的影响．对比研究了甲酸处理和传统无机酸热法提取到的微藻油脂脂肪酸组成和相对含 量．最后考察了甲酸处理对不同微藻原料的适用性． 1 实验部分 1．1 材料与仪器 微藻Chlorellaprotothecoides(新奥集团)、Nannochlorumsp(中国科学院南海海洋研究所)和Nanno- chloropsisoceanic(烟台海融生物技术有限公司)；十七碳酸 甲酯标准品(色谱纯，Sigma公司)；质量分 数为 14％的三氟化硼甲醇溶液 (Sigma公司)；0～ mol／L氢氧化钠 甲醇溶液 (自制)；甲酸(质量分数 收稿 日期：2014-07-29．网络出版 日期：2015-01-30． 基金项 目：国家 自然科学基金(批准号、清华大学 自主研发基金 (批准号：2011Z02140，2012Z98148，2012Z02295)和国 家 “八六三”计划项 目(批准号 ：2