大鼠血清中单胺类递质的高效液相色谱荧光检测法分析.pdfVIP

维普资讯 药物分析杂志ChinJPharmAnal2006，26(2) 一 215一 大鼠血清中单胺类递质的高效液相色谱 一荧光检测法分析 郑春梅，张惠云 (山东中医药大学，济南250014) 摘要 目的：用HPLC—FLD分离测定大鼠血清中单胺类递质，研究其与PMS肝气逆证的内在关系。方法：采用ZorbaxSB— cl8色谱柱 (4．6am×250am，5 m，Agilent公司)，流动相为甲醇一O．02mmol-L 柠檬酸三钠水溶液(1：99，用盐酸调pH 5·O)，流速1．0mL。rain～，激发波长280nm，发射波长315nm。血清样品经5％(体积分数)高氯酸溶液去除蛋白质后取上清 液进样，测定血清中单胺类递质含量。结果：大鼠血清中去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(E)、多巴胺 (DA)和5一羟色胺 (5一 HT)的回收率分别为97．6％，98．O％，96．4％，103．O％；RSD为 1．1％～1．2％，重复性较好。结论：结果表明，该方法操作简便、 快速、准确 ，为血清中单胺类递质检测的一种理想方法 ，并适用于f}缶床相关研究。 关键词：高效液相色谱法；荧光检测；单胺类递质；血清 中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号 ：0254—1793(2006)02—0215—03 HPLC —FLD analysisofmonoaminetransmittersinserum ofrats ZHENG Chun—mei．ZHANG Hui—yun (ShandongUniversityofTraditionalChineseMedicine，Jinan250014，China) Abstract Objective：Ahishperformanceliquidchromatographicmethod，coupledwithfluorescencedetection (HPLC—FLD)，wasdevelopedforthedetemrinationofmonoaminetransmittersinserumofrats．Methods：Item— ployedaZorbaxSB—Cl8column(4．6mm×250mm，5I．Lm，Agilentcompany)nadFLDdetection280nmand315 nmrespectively。nadthemobilephaseconsistedofmethanol一0．02mmol-L trisodiumcitratedihydrate(1：99， adjustedtopH5．0wihthydrochloricacid)；hteflowratewas1．0mL ·min～．Serumsampleswerefirstprecipita— tedwitha5％ perchloricacidsolution．htencentrifugedtoremoveproteinresidualandfinallyassayed．Results： TherecoveryrateandRSDofnorepinephrine(NE)，epinephrine(E)，dopamine(DA)，5一hydroxytryptamine(5一 HT)were97．6％，98．0％，96．4％，103．O％ and1．1％一1．2％．Theresultsrepeatedwel1．Conclusions：There— suitsprovehtatthemethodissimple，fast，accurateandcanbeusedtodetemr inesimultaneouslytheconcentrationof monoaminertna smitters inseurm ofratsandmaybeapplicabletorelevantclinical studies． Keywords：Highperfomranceliquidchromatorgaphy(HPLC)；