诱导葡萄多倍体研究.pdfVIP

维普资讯 ～ 果 树 科 学 ．12(3) journalofFru_1Scierice 诱导葡萄多 体研究 ·／ 陈 兰兰 李太保 桂学梅 (山 省农科院果树研 究所 太 各 030800】 摘 要 用秋水仙素诱导瑰 宝 (2n一38)种子 获得葡萄多倍体的方法 ，观察了诱变 多倍体的细 衅关键词 ： 笈 hi — 堕；乏笪箜直 ；坐些童 砀。及 7 多倍体育种是获得大粒葡萄新品种的重要途径之一 √诱导葡萄多倍体研究在世界各国已 进行多年 “。早在 50年代 ，Dermen报道了在夏葡萄 (Vi~isaestivatis)、欧洲葡萄 (．z,inif#ra) 和圆叶葡萄 (．rotundifotia)中通过诱导获得了四倍体或嵌合体 ：；70年代末．前苏联 马格拉 契葡萄酿酒和栽培科学研究所为丰富欧亚种葡萄的基因型而诱导出许多有丝分裂的多倍体植 株，并对多倍体葡萄的细胞遗传特性进行了研究。 我国在诱导葡萄多倍体研究方面报道甚 少，仅张淑爱等 “和李佩芬等 报道了诱导葡萄试管苗茎段和胚状体堆获得了少量多倍体植 株．但 尚在研究阶段 ，而且是采用特定试材在特定条件下进行的 为寻求在一般条件下诱导葡 萄多倍体行之有效的方法，丰富欧亚种葡萄多倍体的种质资源 ．1991 1993年我们以瑰宝种 子为试材，用秋水仙素诱导 ，以期获得多倍体葡萄的种质材料，加速大粒葡萄育种进程 。 1 材料和方法 1．1 材料 试验在山西农业科学院果树研究所进行。选用二倍体瑰宝葡萄种子。 1．2 方法 1．2．1 多倍体诱变方法 采用种子浸渍法。分两种处理组台：(1)不同秋水仙素浓度与不同浸 渍时间的处理组合。层积种子于3月份先行催萌，待萌发初露白尖后 4d，即胚根长度为 lcm左 右时，用 0．2 、0．3 、0．4 、0．5 、0．6 、0．7 、0．8 7个浓度的秋水仙素溶液浸渍 36、 48、60、72，84、96h6个时间梯度，以清水浸渍种子为对照，共 蟠 个处理组合 ，每处理组合 60粒 种子，浸渍时气温 24±1℃ 处理后清水}先净，播于温室营养袋中 (2)种子萌发后不同天数与 不同浸渍时间的处理组台，用 0．6 的秋水仙素溶液 ，在种子萌后 2、4、6d即胚根长度分别为 0．5、1．0、1．3cm 左右时，浸溃 上述 6个时间梯度，共 18个处理组合 ，试验方法和条件 同前，每 处理组合浸渍 80粒种子 ，选用 60粒播种 。 1．2．2 多倍体鉴定方法 (1)茎尖、卷须染色体观察 ：上午 9 uh取样 ，采用 Carnoy’s液固 定，1otol·l。。盐酸解离 ．卡宝品红染色，常规压片法 。(2)倍性鉴定：①扦插诱变多倍体材料的枝 条 ．生根后进行根尖细胞染色体数 目观察，方法同前。②对 已开花的植株，随机测定和统计 j0 个花粉粒的大小。③6月中旬采集健壮新梢上 已停长的第 6片叶，每份诱变多倍体材料取 6张 本文于 1994—0l 26收到；1994 0j 13收到修改稿 · 山西省青年科学基金资助项 目。本研究得到丁时阳寿如研究员的指导和帮助，谨致谢意 维普资讯 果 树 科 学 12卷 叶片 ，在叶片中肋两侧剪取约 lcm 的小片，用戴洪义等 “解离和染色方法 ．每张叶片随机测定 lo个气孔保卫细胞的大小及其中叶绿体数，以巨峰 (四倍体)、瑰宝(二倍体)为对照，对所得数 据进行显著性测验 ，综合判别其倍性结构。 2 结果与分析 2．1 诱变率 2．1．1 浓度与浸渍时间对诱变率的影响 试验表 明，出苗率随浓度的增高和浸渍时间的延长 而降低 。整个处理组合均反映了这一趋势。以不同浓度浸渍 84h(表 1)和同一浓度浸渍 36— 96h为例(表 2)，从表中可以看出，随浓度的增高．出苗率 由63．3 降低为 31．7 ；随浸渍时间 的延长 ，出苗率 由 56．7 降低为 38．3 。从诱变效果看，0．2 --0．8 的秋水仙素溶液处理 ，