高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶的活性.pdfVIP

中国卫生检验杂志)##; 年’ 月 第$; 卷 第’ 期! H0.2868 g=1?2-/ =A G8-/0 F-^=?-=?@ B8:02=/=3@ ，W13 )##; ；c=/ $;! P= ’ ’% 【论著】 高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶的活性 $ ) ! ) $ $ 吴珏珩 ，黄! 民 ，张建萍 ，吴燕飞 ，汤丽芬 ，张选红 （$7 中山大学基础医学院分析测试中心，广州! ;$##’ ； )7 中山大学药学院临床药理教研室，广州! ;$##’ ；7 广东省佛山市中心血站，广东佛山! ;)’### ） ［摘要］! 目的：建立一种改良的高效液相色谱法测定人红细胞中巯基嘌呤甲基转移酶（0.=1?.28 ,80@/?-26A8?-68 ， BCDB ）的活性。方法：采用反相高效液相色谱法直接测定酶促反应的产物( * 甲基巯基嘌呤的浓度，从而计算红细胞中 BCDB 的活性。以( * 巯基嘌呤为底物，E * 腺苷* F * 甲硫氨酸作为甲基供体，红细胞裂解液在一定的条件下进行孵化， 然后经乙酸乙酯萃取处理后，用GCFH 分析。色谱柱为0@8?6./ IJE H$’ ，流动相为水* 甲醇* 三乙胺（磷酸调至G 7 ; ） （%(7 ’K )K #7 ) ），紫外检测波长为)# 2, 。结果：( * 甲基巯基嘌呤在 $# L )## !3M F 范围内呈良好的线性关系，相关系数 ! N #7 O ，最低检测限为 !3M F（EM P N ），平均回收率为’(Q L OQ 。我们运用该法测定了)% 例健康中国成年人红细 胞中BCDB 的活性，其平均活性为（$$7 ( R 7 )% ）2,=/M 0 ·,/ C-:S89 TIH，男性和女性的平均BCDB 活性分别为（$)7 #’ R 7 ’ ）2,=/M 0 ·,/ C-:S89 TIH 和（$$7 % R 7 #% ）2,=/M 0 ·,/ C-:S89 TIH，两者无显著性差异。结论：本分析方法具有灵敏准 确，重复性好，安全可靠，易于推广等特点，能满足巯基嘌呤类药物药代动力学研究和临床用药监测的要求。 ［关键词］ ! 反相高效液相色谱法；巯基嘌呤甲基转移酶；( * 巯基嘌呤；( * 甲基巯基嘌呤；红细胞裂解液 ［中图分类号］ V ! U(;%7 % )! ! ! ! ［文献标识码］! W! ! ! ! ［文章编号］! $##O * ’(’;（)##; ）#’ * #’% * #O !#$%’(#)’ )* +,%(’ $- ./))- 0// #+)1,$’ %#+2/#$(’3*$(3 (0#4#2 .2 +5+ * 1$*)$%(’0 /6,- 0+$)%(#)5$(1+0 %#+)- # $#%’%() $ ，*#+() ,-() ! ，.’+() $-+(/ -()) ，# 0+(1 %- ，2+() 3-1 %($ ，.’+() 4#+(’5() $ （$7 W2-/@.:-/ B86.23 H828? ，I-6.: D89.:-/ H=//838 ，E12 X- * 682 Y2.Z8?6.@ ，[1-2350=1 ;$##’ ，H0.2- ；)7 J8-?,82 =A H/.2.\ :-/ C0-?,-:=/=:@ ，E:0==/ =A C0-?,-:81.:-/ E:.82:86 ，E12 X- * 682 Y2.Z8?6.@ ，[1-2350=1 ;$##’ ，H0.2- ；7 ]=60-2 I/==9 H82\