围生期Bisphenol+A暴露对雄性子一代脑发育的影响及机理研究初探.pdfVIP

第六届气象、环境与健康学术研讨会论文集 A暴露对雄性子一代脑发育的影响 围生期Bisphenol 及机理研究初探 龙冬梅1吴德生2 1成都军区疾病预防控制中心6100212四川大学华西公共卫生学院 endocrine 环境内分泌干扰物(environmental A， 要物质，可以模拟天然激素的作用，扰乱内分泌系统的正常功能。双酚A(bisphenol BP：A)是一种具有雌激素活性的环境内分泌干扰物，广泛用于各种制造业，如塑料和环氧树 脂。研究表明BPA可从所含物品中释放进入环境中，对人类及野生动物造成威胁。越来越 多的研究表明，BPA进入机体后，可以模拟内源性雌激素的作用干扰体内正常激素韵功能， 对机体产生多方面的影响，特别是在组织形成和发育的关键时期(如胚胎期和新生儿期) 的暴露，能对敏感组织的发育和远期功能产生显著效应。研究表明，BPA能够对脑的发育 产生有害的效应，BPA对中枢神经系统具有潜在的毒理学作用；围生期暴露于非常低水平 的BPA可以影响甲状腺功能，继而影响脑发育。因此本研究根据当前的研究现状，通过在 围生期(孕期和哺乳期)对母鼠进行BPA灌胃染毒，观察对雄性子一代脑发育的影响。 目的研究围生期母鼠BPA暴露对雄性子一代脑发育的影响及其机制。 方法1、染毒和取材方法对母鼠从妊娠第1I天直至产后断乳期(即出生后第21天， 21，PND21)进行BPA灌胃染毒，剂量浓度分别为100、20、2mg／(kg·d)， postnatalday 对照组则用同体积的食用色拉油灌胃。在子代大鼠出生后不同时间点(PNDl，5，10，15， 21，30，45)分别记录其体重，并各取子代雄性大鼠6只进行脑组织取材。大鼠采用断头 处死法。迅速处死大鼠取脑组织，按矢状切面分开，一部分固定包埋进行组织病理学检测 和免疫组织化学染色，一部分提取RNA用RT-PCR方法检测mRNA表达。 2、检测指标及方法(1)检测围生期母鼠BPA暴露后雄性子一代在出生后不同发育时 间点的体重和脑组织病理学改变；(2)免疫组织化学方法检测PND21脑组织中雌激素受体 (estrogen transducerandactivatorof 信号转换和转录激活因子3(signal ERa、 mRNA的表达。 ERIB、c．fos和P450arom 结果 各BPA剂量组脑组织均有不同程度的异常改变，主要表现为海马CA3区锥体细胞和大脑皮 质神经元发生核固缩变性，其中高剂量组和中剂量组较为严重。在PND45各BPA染毒组异 常细胞减少，海马和皮质神经元总数减少。结果表明围生期母鼠BPA暴露可影响子代发育， 提示不同剂量的BPA可能通过不同的方式影响子一代的发育包括脑发育，高剂量可能发挥 毒性作用。 ·18· 第六届气象、环境与健康学术研讨会论文集 可以影响雄性子代脑P450arom表达。 3、免疫组化和RT-PCR检测都显示在PND21 mRNA表达增强，提 ER和ERtx、ERB 示BPA可通过改变脑的雌激素受体表达影响脑发育。 4、免疫组化染色和RT-PCR检测结果都显示PND21BPA组雄性子代脑C．FOS蛋白和 C．10s mRNA表达上调。 弱，但统计学上没有显著差异；中、低剂量组可引起PCNA表达增加，统计学上差异显著 (P0．05)。 6、STAT3免疫组化结果显示高剂量BPA暴露可引起PND21STAT3在海马表达减弱。 7、NT-3结果显示三个BPA剂量组在PND21NT-3在脑组织表达均下调，与对照组差 异显著(