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里氏木霉纤维素酶的分离纯化及酶学性质.pdf
8 3 Vo.l 8 No. 3
2010 5 Ch inese Journal of B ioprocess Engineering M ay 2010
do:i 10. 3 6 / .j issn. 1672- 3678. 2010. 03. 008
朱年青, 夏文静, 勇 强
(南京林业大学林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实 室, 南京 210037)
: 通过( NH ) SO 分级沉淀H iPrep 26/ 10 Desalting凝胶色谱脱盐Source 15 Q 阴离子交换色谱技术, 里氏木
4 2 4
霉( Rut C30)纤维素酶主要组分得 初步分开, 再经过 Source 15 S阳离子交换色谱H iPrep Sephacryl S100 HR凝
胶过滤色谱Superdex 75 PrepGrade凝胶过滤色谱进一步分离纯化, 得到 2 个纯化的内切葡聚糖酶组分 EG EG!
4
和 一个外切葡聚糖酶组分 CBH !; 经过 SDSPAGE 电泳鉴定为电泳纯, 测得相对分子质量分别为 522 ∀ 10 ,
4 4
562 ∀ 10 和 6 0 ∀ 10 EG 的最适反应 pH 是 56, 最适反应温度为65 # ; EG!的最适反应 pH 是44, 最适反应
温度为55 # ; 羧甲基纤维素 ( CMC) 为底物时, EG!EG 的米氏常数 (K m ) 分别为220 m g/mL338m g/mL
CBH!的最适反应 pH 是 58, 最适反应温度为60 # , 对硝基苯基- - D - 纤维二糖苷( PNPC) 为底物时, 米氏常
数(K m )为012 mg/mL
: 里氏木霉; 纤维素酶; 酶学性质; 分离纯化
: Q814 : A : 1672- 3678( 2010) 03- 0040- 04
Purification and characterization of cellulase from Trichod erma reesei
ZHU N ianqing, X IA W enjing, YONG Q iang
( K ey Laboratory of Forest G enetics B iotechnology, Nanjing Foresty Un iversity, Nanjing 210037, China)
Abstract: The cellu lase of Trichoderma reesei Rut C30 was separated by ammon ium su lfate precipitation,
H iPrep 26/10 Desalting gel layer chromatography and Source 15Q an ion exchange. Two endoglucanases
( EG II, EG I) and one cellobiohydrolase CBH Iw ere purified to homogenety by using H iPrep Sephacryl
S100 HR, Superdex 75 PrepG rade gel layer chromatography and Source 15 S cation exchangerThe enzyme
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