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黑曲霉液态发酵生产果胶酶的工艺条件初探.pdf
《食品研究与开发》2005年4月第26卷第2期 63
1．2．2发酵培养基：2．5 表2不同氮源和添加量为产酶的影响
g麸皮，1．5鲜苹果渣，1．0g
硫酸铵，0．05舒j}册4，o．025鲥gS04·7}bO，O．025gKCl， (NH4)2s0。N}14N03KN0，酵母膏蛋白胨对照
0．025 添加量／g 1．0 0．6051．315O．7501．696 0
g无水N帮04，FeS04·7H20微量，蒸馏水50mL，
12．5095．00427．52012．310
起始pH2．0。 酶比活力(叭血)39．655．15．010
1．2．3发酵条件：发酵温度30℃，接种量2．0％，装 由表3可知：以(NH4)2S04作为氮源，最适添加
瓶量50mL，摇床转速190r／min，在250mL三角瓶 量为1．0
g，可以获得较高的酶活。
中振荡培养5d。 表3(NH4)2sO·不同添加量对产酶的影响
1．3果胶酶活力测定方法及酶活定义：取1％果胶
溶液10mL，加蒸馏水5mL，50℃预热15min后加
入稀释一定倍数的酶液5IIlL，50℃水浴保温反应1h， 2．1．3培养基的组成对产酶的影响：发酵培养基以
采用次碘酸钠漓定法l习测定酶活。在上述条件下，每 麸皮为主，添加鲜苹果渣和硫酸铵。以不同配比的
h催化果胶水解生成l 培养基进行比较试验，结果表明(见表4)：培养基对
mg当量半乳糖醛酸的酶量
定义为1个酶活力单位(u)。 产酶影响很大，其中培养基组成2．5
g麸皮，1．5g鲜
2结果与分析 苹果渣，1．0g硫酸铵较好。
2．1产酶培养基的优化 表4培养基的组成对产酶的影响
2．1．1诱导物对产酶的影响：以富含果胶的鲜苹 序号麸皮／g鲜苹果渣／g硫酸铵／g起始pH酶比活力(u／mL)
果渣和商品果胶作为诱导物，辅以适量的氮源和
少量的无机盐进行产酶试验。经过发酵，结果表
明(见表1)：随着诱导物加入量的增大，菌体含量
随之增多，并对果胶酶的酶活影响较大。两者既
可作为黑曲霉所分解利用的碳源，又可作为诱导
物，均能有效提高果胶酶的产量。果胶的加入不
仅仅使培养基的营养成分充足，也诱导了果胶酶
专一性的mRNA合成：但其成本又太高，故选用
鲜苹果渣。
2．1．4磷酸盐对产酶的影响：在基础培养基中分别
表1诱导物对产酶的影响
添加0．059K：HPO。和KH：PO一进行对比试验。结果表
明(见表5)：二者对产酶均有提高作用，但K2HPO。
相对来说效果更好。
表5磷酸盐对产酶的影响
2．2发酵条件的优化
2．2．1培养温度对产酶的影响：采用最适培养基，
在不同温度下对已接种的发酵液分别进行恒温振
2．1．2不同氮源和添加量为产酶的影响：在麸皮培 荡培养。结果表明(图1)：生产果胶酶的最适培养温
养
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