单分子毛细管电泳 - 评述与进展.pdfVIP

( ) 第 30 卷 分析化学 FENXI HUAXUE 　评述与进展 第 7 期 　　　　　　　　 　　　 　　　　　　　　　 　　 2002 年 7 月 Chinese Journal of Analytical Chemistry 869～874 评述与进展 　　　 　　　单分子毛细管电泳 盖宏伟　白吉玲　林炳承 ( 中国科学院大连化学物理研究所 ,大连 116023) 摘 　要 　对室温下液流中的单分子光学检测技术的基本原理、主要方法以及它在生物学中的应用做了综述。 重点强调了毛细管电泳与单分子检测相结合 ———单分子毛细管电泳在分析科学中战略上的重要性 ,并展望 了以单分子光学检测技术为特征的单分子毛细管电泳在分析化学中的应用前景。 关键词 　单分子毛细管电泳 ,单分子检测 ,评述 1 　引　　言 毛细管电泳( ) ( ) ( ) CE 技术在显示其分离能力的同时 ,正和激光诱导荧光 LIF 、电子偶合器件 CCD 等 技术相结合 ,开展了在单分子的层面上对不同物质实行分离检测。自从原子、分子的概念建立以来 ,人 们就梦想能对单个原子、分子进行观察和操纵。对分析化学家来说单分子检测是高灵敏分析的最终目 ( ) 标。与系综方法仅提供体系的平均性质相比 ,单分子检测 single molecule detection , SMD 技术能探测到 ( ) ( ) 物理量的分布和时间轨迹信息 ,因此可以用来鉴别 identify 、分类 sorting 及定量比较某一非均相体系 ( ) 中的各亚群 subpopulation ,还可以研究平衡状态下体系的涨落及非平衡态下的反应途径。SMD 的出现 使生物学成为最大的受益领域。有可能在以下几个方面取得突破性的进展1 : (a) 在生理条件下对“稀 有”分子结构和活性的大规模筛选 ; (b) 以最高的灵敏度进行分子检测; (c) 实现反应中间产物的检测。 2 1990 年 ,Shera 等 第一次实现室温下流体中的单分子光学检测。10 年来 SMD 技术发展迅猛 ,先后出现 ( ) 3 4 了近场扫描显微镜技术 NFOSM 和远场共焦显微镜技术 。随着 CCD 性能提高 ,宽场显微镜也用于 5 6 单分子荧光成像中 。在简单体系中 ,分子的识别和检测不需作先行分离。1995 年 ,Haab 等 首次将 SMD 与 CE 相结合 , 以电泳淌度做为识别参数之一,成功地使毛细管电泳达到单分子检测水平 ,从而产 生了单分子毛细管电泳的概念。单分子毛细管电泳代表了电泳发展的最新趋势之一 ,尽管 SMD 发展仅 有 10 年 ,但已经发表了许多很好的综述7 ～14 。本文重点对室温下液流中 SMD 技