Sertoli细胞对同种异体调节性T细胞辅助性T细胞17分化平衡的调节作用.pdfVIP

第 43卷第 6期第 626页 华中科技大学学报 (医学版) Vo1．43 No．6 P．626 2014年 12月 ActaMedUnivSciTechnolHuazhong Dec． 2014 Sertoli细胞对同种异体调节性T细胞 ／辅助性 T细胞 17分化平衡的调节作用* 陈莲一 ， 谢 林 △ 湖北省医学会 ，武汉 430071 华 中科技大学 同济医学院附属 同济医院器官移植研究所 ，器官移植教育部重点实验室， 卫生部器官移植重点实验室 ，武汉 430030 摘要：目的 研究 Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞 (Treg)／辅助性T细胞 17(Thl7)平衡的影 响。方法 体外分离并培养 Sertoli细胞、T淋 巴细胞和骨髓来源的DC细胞 ，将 Sertoli、DC细胞分别与 同种异体 T细胞 混合培养 ，光镜及 电镜下观察 Sertoli细胞形态，采用 Westernblot检测 Sertoli细胞 中人类主要组织相容性复合体 (MHC)一II、B7一H1蛋 白的表达 ，收集培养上清液 ，采用酶联免疫吸附实验 (ELISA)法检测 Sertoli细胞培养上清 内的转 化生长因子(TGF)8、IL一17A等细胞 因子水平 ；流式细胞术观察混合培养细胞分化结果 。结果 成功在体外培养 Ser toli细胞 ；Westernblot结果显示 ，Sertoli细胞与同种异体 NaiveCD4 T细胞 (CD4 CD62L CD25 )在体外混合培养 时，其表面的MHC一Ⅱ类分子和B7一H1分子的表达量增加 ；ELISA结果显示，与同种异体NaiveCD4 T细胞混合培养 72h后，培养上清液中的TGF-31浓度较单纯 Sertoli培养组显著升高L(823．10~-59．07)pg／mLus．(174．89±23．51)Pg／ mL，P0．01]；流式细胞术结果显示 ，与 同种异体 Sertoli细胞共 同培养 的体系 内，NaiveCD4 T细胞 (CD4 CD62I CD25一)被诱导分化为 CD25。。Foxp3 Treg细胞的比例显著增加 ，从1．0 增长至 27．6 ；用 Sertoli细胞与 Treg细胞 混合培养上清液孵育 DC细胞 ／NaiveCD4 T细胞，可明显减少培养液中IL17A 的浓度，使其从 (361．58±8o．27)Pg／ mI降低至 (137．54±52．19)pg／mL(P0．05)；同时 IL17A T细胞亚群百分 比也显著降低 (27．2 降至 17．9 )。结 论 Sertoli细胞体外培养产生 的抗炎细胞 因子和免疫抑制细胞 因子能诱导 NaiveCD4 T细胞分化为 CD25 Foxp3 Treg细胞 ，Sertoli细胞可能通过调节同种异体 Treg／Thl7分化平衡 ，诱导免疫耐受 。 关键词 ：Sertoli细胞 ； 免疫耐受 ； 调节性 T细胞 ； 辅助性 T细胞 17 中图分类号 ：R329．2 DOI：10．3870／j．issn．1672—0741．2014．06．003 M odulation ofRegulatoryT Cell—Thl7DifferentiationBalancebyAllogeneicSertoli ChenLianyi。XieLin△ H ubeiM edicalAssociation，W uhan430071，China 。InstituteofOrganTr口 pzn ￡口fo ，KeyLabofMinistryofEducationandMinistryofHealthofChina， TongJiHospital，TongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTe