依维莫司对人非小细胞肺癌细胞系A549放射增敏作用.pdfVIP

医药导报2014年 12月第33卷第 12期卷终 ·1541· · 药物研究 · 依维莫司对人非小细胞 肺癌细胞系A549放射增敏作用米 陈豫，褚倩，郭娟，黄玉，李文雯，田逸俊，夏曙，于世英 (华中科技大学同济医学院附属同济医院肿瘤科，武汉 430030) 摘 要 目的 通过使用哺乳动物雷帕霉素靶蛋 白mTOR抑制药依维莫司抑制A549细胞mTOR信号通路 ，研究依 维莫司是否具有放射增敏作用。方法 单纯放射治疗(放疗)或联合依维莫司作用于人非小细胞肺癌细胞系A549，采用 噻唑蓝 (MTT)法测定依维莫司对A549细胞抑制率并计算半数抑制浓度 (IC )。应用药物20％抑制浓度 (Ic20)作用 24h后X线2，4，6，8Gy照射。计算细胞克隆存活分数及 多靶单去模型拟合生存曲线，并计算平均致死剂量 (D。)、准阈 剂量(D。)、照射剂量2Gy下细胞存活分数(sF2)和放射增敏比(SER)。采用Westernblot方法检测 一H2AX蛋白的表 达，并分析相对灰度值。结果 依维莫司联合放疗可明显提高A549细胞对射线的敏感性，依维莫司+照射组 D D及 SF2均明显低于单纯照射组，SER为 1．36。依维莫司+照射组x线照射后24h点 一H2AX蛋白残余量明显高于单纯照射 组。结论 依维莫司抑制mTOR信号通路能够提高A549细胞的放射敏感性。 关键词 依维莫司；癌，非小细胞肺 ；放射增敏；信号转导通路 中图分类号 R979．1；R734．2 文献标识码 A 文章编号 1004—0781(2014)12—1541—04 EffectofEverolimusonRadiosensitivityofHumanNon-smallCellLungCancerCellLine A549 CHENYu，CHUQian，GUOJuan，HUANGYu，LIWen—wen，TIANYi-jun，XIAShu，YUShi—ying(Department ofOncology，TongjiHospital，rongjiMedicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan 430030，China) ABSTRACT Objective Toexploretheeffectofmammaliantargetofrapamycin (mTOR)inhibitoreverolimuson radiosensitivityofhumannon—smallcelllungcancercelllineinvitrobyusingeverolimusto ihn ibitmTOR signalingpathwayof A549． Methods Humna non—smallcelllungcnacercelllineA549wassubjectedtoradiationaloneorincombinationwith everolimustreatment．The50％inhibitionconcentration(IC∞)ofeverolimusinA549cellswasdetectedbymethyhhiazoltetrazolium (MTF)assayinvitro．Everolimusatthe20％inhibitionconcentration(IC20)wasusedtopretreatA549cellsfor24h．Cellswere thenirradiatedbyX—raywith2，4，6，8Gy．Thecellsurvival fractionwascomputedbycloneformation．Cellsurvivalcurvewasfitted bymuhitargetone—hitmodel，nadmeanlethaldose(D0)，dosequasithreshold (D)，survivalfractionat2Gy (SF2)，nad