电荷耦合器件检测器在毛细管电泳中的应用进展.pdfVIP

电荷耦合器件检测器在毛细管电泳中的应用进展* 熊少祥 李建军 程介克 （武汉大学化学系 武汉 430072） 析时间减少至原来的七分之一。我们将引进的CCD 1 前言 配以国产光源等部件，组成了多波长荧光检测CE 电荷耦合器件 c（harge-coupleddeviceCCD检 装置，得到了强度-波长-时间三维电泳图[3。用于混 测器是一类新型的光学多道检测器 与其它检测器 合荧光物质的CE分离，可根据被测物的标准荧光 相比，具有光谱范围宽、量子效率高、暗电流小、噪音 图谱，直接鉴定和测量各个电泳峰所示的化合 低、灵敏度高、线性范围宽、可同时多行获得数据及 物[14。对电泳不能分离的组分，则可以利用CCD光 得到波长-强度-时间三维谱图等优异性能[]，已广 谱分辨的突出优点，用卡尔曼滤波处理重叠光谱，得 泛用于原子光谱、分子光谱、拉曼光谱、分离科学、图 到各个组分的电泳信息[5] 象分析等分析化学领域[3]，显示出诱人的应用前 为了进一步提高CCD荧光检测的灵敏度， 景 成为光谱分析检测技术中的重大革新装置 Sweedler等[6将已成功地用于航空摄影、卫星监视 毛细管电泳–CE）因其具有分离效率高、进样量 的延时积分 time-delayedintegration，TDD操作模 小、分析速度快等优点，近年来发展迅速，成为新兴 式引人CE，轴向导入激光激发样品，在2cm长的毛 的分析化学前沿分支学科[4?。CCD检测器在这一 细管窗口上收集荧光信号。该模式工作时按电泳谱 领域也得到了应用，而且显示出一些其它类型检测 带的迁移速度调整光致电荷的转移速度，使曝光与 器无法比拟的优点。本文对CE中应用CCD检测器 电荷转移同步进行，大大延长了样品的荧光收集时 的进展概况做一评述。 间，增加了信号强度，异硫氰酸荧光素FITC）的检 2单柱毛细管电泳singlecolumncapillary 测限达到 1.2×10-20mol，可分离检测zmol范围的 FITC标记氨基酸。根据荧光光谱和迁移速度的差 electrophoresis，SCE） 1990年，Cheng等[首次将CCD引入CE研究 别，还可区分荧光素和磺基罗丹明101。此系统用于 罗丹明标记物的检测，检出限小于1000个荧光分 领域 ，由于CCD用于荧光等弱光条件非常理想] 子[7。将其用于实际样品分析 定最测定了亚摩尔 故可以用作监测CE的灵敏检测馄器。他们探讨了电 荷 储[]、积分时间等操作参数对系统性能的影响。 级的海生软体动物包细胞中的神经肽物质[8。Tra- 与用光电倍增管检测器的系统进行了比较，首次得 cht等[9发展了一个利用CCD进行柱后放射性检 测CE系统。电泳毛细管中的流出液直接导向涂有 到了具有光谱分辨的三维荧光电泳图。在氩离子激 固态闪烁体的膜上，电泳时，此膜沿着事先设计好的 光光源下，荧光素的检出限达到1×10-1mol。Chen 路线不断移动，被分离物在膜上的不同位置与闪烁 等[2则将CCD用作CE的柱上拉曼多道检测器，使 体作用。电泳结束后，膜上的放射性光发射，通过照 用400m