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神经节苷脂的高效液相色谱-化学衍生方法进展 徐桂芸 常理文 （中国科学院化学研究所 北京 100080） 使定量的误差较大。而且分离效率和检测灵敏度远 1 前言 远满足不了一些低含量和复杂体系生物样品的分析 神经节苷脂 G（anglioside）是一类含有唾液酸 要求。为了提高检测的灵敏度和改善分离效率，高效 Sialicacid）的酸性鞘氨醇糖脂，由鞘氨醇 Sphingo- 液相色谱 HPLC）技术已被应用到神经节苷脂的分 sine、脂肪酸、寡糖链三部分组成。它采用Sven- 析上。本文就这方面作一简介。 nerhnolm 的通俗命名法，例如GM4GD1GT1b和 2 神经节苷脂的高效液相色谱分离 GQ1b等。其中，G代表神经节苷脂；大写M DTQ 和P分别表示所含的1 5个唾液酸基团；阿拉伯数 1（HPLC对高沸点、不挥发性化合物是一个非 字 1 4分别代表除唾液酸外从4个糖残基到1个 常有效的分离和检测手段。成功的分离神经节苷脂 首先是在硅胶的正相色谱上进行的2229。通常用氯 糖残基的糖链；小写字母ab等表示唾液酸连接不 仿-甲醇-水或者异丙醇-正己烷-水体系作流动相，神 同的位置 。 神经节苷脂广泛分布于动物的各种组织细胞膜 经节苷脂按其含糖残基的数目完全分开。其流出顺 上，有着多种生物学功能，其中包括表面受体作 序是随着糖残基的增加而保留时间增长。图1是神 经节苷脂的对溴苯甲酰甲基酯在硅胶柱上的分离谱 用2〔3、细胞识别与粘合作用4〔〕、细胞生长及分化 的调节作用8〔9，并且也是与肿瘤相关的糖脂抗 图32〔。从图1可以看到在含有相同数目唾液酸残基 的GM4GM3GM2和GM1中，糖链最短的GM4先 原 1〔1〕 。因此有关神经苷脂的各种研究一直很活 被洗脱下来，最后流出的是糖链最长的GM1。GDa 跃。自然，对于它的分离纯化、结构和定量分析的方 和GM1含有相同数 目4（个）糖的残基。而在GDla的 法学也得到迅速发展。应用薄层色谱 T（LC）法分析 分子中所含两个唾液酸的羧基被酯化，使它带上两 神经节苷脂是比较成熟的技术 〔11〕。常用含石膏的 个疏水的苯环，从而它的极性变得比GM 的衍生物 硅胶色谱板，使用氯仿-甲醇-水体系作为展开剂，显 要弱，所以它在GM1的前面流出。 色剂为间苯二酚-盐酸混合液，在 580nm处经光密 ?（2┯捎谏窬谲罩囊欢耸乔姿奶橇矗 度薄层扫描仪进行定量20〔21。由于各条谱带显色反 端是疏水的脂肪链，所以反相色谱技术更适合于对 应完全程度的不同以及板与板之间质量上的差异， 本文收稿日期：1994年3月12日，修回日期 1994年4月26日 它的分离 一些实验室?〔〕使用十八烷基或辛基键 装置的发展，使HPLC成为分离神经节苷脂的混合 合硅胶柱，甲醇-水作为流动相，神经节苷脂按其含 物和异构体的有效技术。Jiaden 的实