影响AM真菌孢子萌发因素的研究.pdfVIP

第 31卷 第 6期 贵州大学学报(自然科学版) Vo1．3lNo．6 2014年 12月 JournalofGuizhouUniversity(NaturalSciences) Dec．2014 文章编号 1000—5269(2014)06—0038—04 影响AM 真菌孢子萌发因素的研究 邓淼汐，唐 兵，黄丽萍，江 龙 (贵州大学 生命科学学院，贵州 贵阳550025) 摘 要：在离体条件下培养AM真菌孢子，测定不同培养基pH值、成分以及培养温度条件下的 孢子萌发率，优化AM真菌孢子的培养环境。结果表明：培养基pH6．0时，孢子萌发率最高，过 高或过低都会抑制孢子的萌发。AM真菌在土壤 中储存两个月最有利于孢子萌发。培养基 中添 加人工合成植物激素GR24对孢子萌发率有极显著影响，浓度450pg／L时，孢子萌发率最高。低 浓度的精胺能够增加孢子菌丝的生长点个数 ，提高孢子的萌发率，含量过高时(40mg／L)抑制 孢子的萌发。培养温度30℃较适合AM真菌孢子的萌发，低于或高于30℃孢子萌发率有所下 降。本试验结果将为构建AM真菌一毛状根双重培养体系提供适宜的培养条件。 关键词：GR24；精胺 ；萌发率 中图分类号：Q935；S183 文献标识码 ：A AM真菌属于专性营养共生菌，至今仍未能实 祥 ，谢丽源 证实独脚金素 内酯可 以促进 AM 现纯培养，只能将其接种在活体植物根系上或是与 真菌菌丝分支，能够更好的与寄生植物结合。 其寄主根系一起培养，常用的培养方法有盆栽法和 本试验从培养基 pH、培养基成分和培养温度 离体双重培养法 。由于盆栽法的培养周期长、培养 对AM真菌孢子萌发条件进行了优化，以期确定适 量大，易污染，又不便运输 ，已较少使用…，其 中纯 宜的AM真菌孢子萌发条件。 基质和沙均可以作为AM真菌扩繁的培养基质，较 l 材料与方法 之两者纯基质更适合扩繁 ；近几十年来，对离体 1．1 试验材料 双重培养法进行了多方面的研究，其中孢子萌发是 1．1．1 供试菌种 初步鉴定孢子属于盾巨孢囊霉 双重培养研究的主要关键之一 。在离体条件 属 (Scutellospora)，土样于 2013年 11月采 自贵州 下，孢子萌发受到多方面因素的影响，董 昌金 研 省贵阳花溪区羊艾烟草种植基地 。 究表明经4qC低温处理 1～2个月可打破休眠孢子 1．1．2 培养基及试剂 孢子萌发培养基 ：水琼脂 的休眠，提高其萌发率 。因此，在土壤 中储存一定 培养基 (1000mL蒸馏水中添加 7．5g琼脂粉)。 时间或经低温处理都会增加孢子的萌发率。对于 孢子消毒试剂：2％氯胺 T(w／v)、0．25％吐温 一20 重金属影响AM真菌孢子萌发来说，高浓度的cd (50mg／kg)和Pb(50mg／kg)对孢子的萌发率 (v／v)、0．02％硫酸链霉索 (w／v)、0．Ol％硫酸庆大 有极显著的影响，浓度越高，萌发率越低。赵腊梅 霉素(w／v) 等 对最佳培养基进行了研究：培养基不含大量 1．2 试验方法 元素和糖类，孢子的萌发以及菌丝的生长不受其他 1．2．1 AM真菌孢子筛选 参照文献中 的湿筛 元素的影响。适当地调控这些影响因素对孢子萌