HSP70被抗体封闭后对星形胶质细胞损伤后BDNF表达的影响.pdfVIP

HSP70被抗体封闭后对星形胶质细胞损伤后BDNF表达的影响.pdf

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一 1334一 重庆医科大学学报 2008年第33卷第 l1期 (JournalofChongqingMedicalUniversity2008.Vo1.33No.11) 文章编号:0253—3626(2008)11-1334—04 HSP70被抗体封闭后对星形胶质细胞损伤后BDNF表达的影响 宋 进 ,张杰敏 ,陈阳关 (1.重庆医科大学附属第二医院神经内科,重庆 400010;2.浙江省衢州市衢化医院,衢州 324004) 摘【 要】目的:探讨用抗体封闭热休克蛋白70(Heatshockprotein70,HsP70)后对星形胶质细胞损伤后表达脑源性神经营养因 子(Brain—derivedneurotropicfactor,BDNF)的影响。方法:原代培养并纯化星形胶质细胞,采用划痕损伤法构建细胞损伤模型, 通过培养液内加入HSP70抗体来进行干预。在不同时间点对对照组和损伤干预组进行BDNF免疫细胞化学染色,观察细胞增生 情况及BDNF的表达强度,并用RT—PCR检~JtBDNFmRNA的表达水平。结果:与对照组相比,干预组BDNF的表达明显减弱(:0.05, PO.O1),GFAPmRNA的表达也明显降低 (:0.05,P0.01o结论 :星形胶质细胞损伤后 ,HSP70可能具有促进星形胶质细胞表达 BDNF的作用。 【关键词】星形胶质细胞;划痕损伤;热休克蛋白70;抗体;脑源性神经营养因子 【中国图书分类法分类号】R651.1+5 【文献标识码】A 收【稿 日期】2007—12—12 EffectofantibOdy—blOCked HSP70on theexpression ofBDNF ininjuredastrocytes SONG Jin,et (DepartmentofNeurology,theSecondAffiliatedHospital,ChongqingMedicalUniversity) A【bstract】Objective:TostudyitseffectontheexpressionofBDNFfrom injuredastrocytesafterHSP70wereblockedby HSP70-antibody.Methods:Weperformedscratchinjuriesinhteculturedratastrocytes,andaddedHSP70一antibodyintothenu— tfientmedium atonceafterinjury(interventiongroup).Then,at30min,24h,4d,7dafterinjury,theexpressionofbrain-derived neurotropicfactor(BDNF)wasstudiedbyimmunocytochemicalandreversetranscriptase-polymerasechainreaction(RT—PCR).The immunocytochemica1pictureswere analyzed by image na alysissystem to abtain the average opticaldensity ofBDNF.Results: TheexpressionofBDNF increasedrgaduallywith injury time.Comparedwiththecontrolrgoup,hteaverageopticaldensityof BDNF intheinterventionrgoupweresignificantlyreduced(PO.05,PO.01).TheexpresstionofBDNFmRNAwasdown-regu— latedinhteinterventiongroup(P0.05,P0.01).Conclusion:HSP70mayplayaroleinhteproductionofBDNFfrom injured astrocytes. K【eyWords】Astrocyte;Scratchinjuries;Heatshockprotein70(HSP70);Antib

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