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分子生物学技术与临床兽医学.pdf
专论与综述
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分子生物学技术与临床兽医学
蔡皓墙,王雪东
1
(黑龙江畜牧兽医职业学院动物医学系。双城15011)
摘要:分子生物学作为一门新兴学科,代表了生命科学研究领域的前沿,新理论、新技术、新成果层出不穷。近几年。
生物技术不断向深度和广度迅猛发展。它的发展与动物疫病的诊断、预防和治疗技术之间已无明显的界限,并显示出
了不可替代的作用。生物技术已经不是--si单一的技术.而是一个综合的技术体系,尤其是在兽医临床上的应用、发
展中,需要多种不同技术、学科和领域的相互渗透、相互配合。
关键词:分子生物学;PCR技术;酶切图谱;单链构象多态,l生;DNA微阵列;DNA结构
从20世纪后期,分子生物学就已成为自然科学中引入 构模型,该模型建立标志着分子生物学的诞生。从上述历史
瞩目的一颗明星。当代分子生物学家断言:就生命科学而言, 回顾中,我们不难看出在该学科的形成过程中,围绕着遗传
结构与功能关系的研究是一个永恒的主题。分子生物学作为 分子DNA结构和功能关系的探讨起了决定性的作用。
一门新兴学科,代表了生命科学研究领域的前沿,新理论、新 2分子生物学技术在临床兽医学上的应用
技术、新成果层出不穷。生物大分子结构与功能关系的研究 2.1核酸的分子杂交——基因探针技术基因探针技术是
对分子生物学的产生和发展起着重要的推动作用,结构和功 临床应用最早的分子生物学技术,至今仍长盛不衰。它不仅
能的辩证统一关系不仅是分子生物学研究或教学的主题,而 用于微生物等基因鉴定方面,而且在印迹技术如方面以及新
且与临床疾病的发生有着密切的关系,研究生物大分子结构 近成为热门的基因芯片技术方面都有广泛应用,不少探针已
和功能的关系,为利用分子生物学理论和技术探索某些疾病 商品化。
的机制提供了有益的参考。 2.2
1 分子生物学产生的历史回顾 过程的技术。可以在短时间内大量复制出原来很少的DNA。
21世纪是生命科学的世纪.而生命科学的前沿又是分 其作为一种新的疾病检测手段,具有灵敏、特异、简便、快速
子生物学,那么分子生物学是怎样一步步展现出其蓬勃发展 等优点,可以从一根毛发、一滴血、一个细胞中扩增出足量的
的趋势的?让我们先看一看19世纪后半叶对生物遗传的认 DNA供分析诊断PCR技术已逐渐应用于遗传性疾病、肿瘤
识。说到遗传,不得不提到遗传学的奠基人奥地利遗传学家 及感染性疾病等的诊断。但该技术大多为定性分析,结果重
孟德尔,它通过对果蝇的形貌和染色体各部分关系的研究, 复性差、可靠性低。因而,给临床诊断带来混乱。近年来常规
发现杂交能改变遗传性状。这一发现在遗传学上的意义在几 PCR技术用于诊断、鉴定、科研、制备探针和进一步结合基因
十年后才被认识。到了1940年,基因与酶、核酸与蛋白质的 工程进行产品开发等。是一项极其有效、非常实用的技术随
关系已开始受到重视,但由于当时错误地认为DNA是四链 着分子生物技术的发展已衍生出许多新方法新技术,如定量
环状结构,没能认识基因的本质,更无法指出染色体与DNA PCR技术、荧光PCR技术、巢式PCR、不对等PCR等。
2.3
的关系。直到1944年Avery等在研究肺炎双球菌时,发现它
们的遗传特性可因加入DNA而发生特异改变,从而阐明了 用特定的限制性酶消化DNA长链后,可以得到核酸的片段。
DNA在遗传中的作用,作为基因载体的染色体是DNA而不由于不同的DNA碱基序列不同,用识别某一特定碱基序列
是蛋白质。但由于当时不了解DNA真正的分子结构,所以无 的限制酶进行酶切时,所得到的DNA链片段的长短也不一
法认识到他对遗传学的真正意义。把这一工作向前推动一步 样。片段的长短可用凝胶电泳进行分离后,与一系列已
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