D-半乳糖引起人正常二倍体细胞衰老的机制.pdfVIP

老年医学与保健2014年第2O卷第6期 GeriatrHealthCare，2014，Vo1．20．No．6 ● 论 著 ● D一半乳糖引起人正常二倍体细胞衰老的机制 沈琮 陈罡 张秀敏 何琪杨 摘【要】目的研究D一半乳糖处理后引起人正常二倍体细胞衰老的机制。方法MTT法榆测细胞存活率，衰老相关 的p一半乳糖苜酶染色鉴定衰老细胞，流式细胞术检测细胞 内活性氧 自由基水平 ，免疫印迹法检测衰老相关蛋 白的表 达。结果 D一半乳糖处理人胚胎肺细胞和肝细胞，均能抑制细胞的增殖。被处理的细胞衰老相关的p一半乳糖苷酶染为 蓝色，细胞内活性氧 自由基水平明显升高，衰老信号通路相关蛋白p53、p21、caviolin—l的表达均升高。结论D一半乳 糖引起人正常二倍体细胞出现典型的细胞衰老表型，可以作为衰老的可靠模型。 [关键词】细胞衰老；D一半乳糖；人正常二倍体细胞；衰老；模型 【中图分类号】R339．38 文【献标识码】A 文【章编号】1008—8296(2014)一06—372—04 D0I：10．39690．issn．1008—8296．2014—06 M echanism ofcellularsenescenceinducedbyD—galactoseinnormaldiploidhumancellsSHENCong，CHENGang， ZHANGXiu—min，HEQi-yang*．InstituteofMedicinalBiotechnology，PekingUnionMedicalCollegeandChineseAcademy ofMedicalSciences Bejiing100050,China Correspondingauthor：HEQi—yang．E—mail：qiyang_he@vip．163．com A【bstract]ObjectiveToinvestigatethemechanism ofcellularsenescenceinducedbyD—galactoseinnormalhuman diploidceils．MethodsCellviabilitiesweredetectedusingMTT．Senescence—associated3-galactosidaseactivityassaywas performedtoshow thesenescentcells．Thelevelsofreactiveoxygenspeciesweredetectedbyflowcytometry． Thelevels ofaging—relatedproteinsweredetectedbyimmunoblottingassay．Results Thegrowth—inhibitoryactionsofD—galactose weredetectedinthehumanembryoniclungfibroblastcellsandlivercells．Thebluecellswereobservedwithgalactosidase stainingintheD—galactose—treatedcells． Theincreasedlevelofintracellularreactiveoxygenspecieshadbeendetectedin thecellsafterexposuretoD—galactose．Theproteinlevelsofp53，p21andcaviolin—1wereelevatedwithidentificationof immunblotting． ConclusionsD—galactosecaninducethetypicalfeaturesofcellularsenescenceinhumandiploidcellsand itisareliablemodelofaging． 1KeywordslCellularsenescence；D—galactose；Humannormaldiploidcells；Aging：Mode1 人口老龄化的困境之一是老年病发病率的快速增 糖类代谢，但过量存在对人体有害。由我国科学家首 加 ，导致