转红色荧光蛋白基因唐鱼外源基因拷贝数的测定.pdfVIP

生 物 技 术 通 讯 LETTERS IN BIOTECHNOLOGY Vol．22 No．1 Jan．, 2011 61 doi: 10．3969 ／ j．issn．1009－0002．2011．01．015 研究报告 转红色荧光蛋白基因唐鱼外源基因拷贝数的测定 樊佳佳，白俊杰，马冬梅，简清 中国水产科学研究院 珠江水产研究所，热带亚热带鱼类选育与养殖重点开放实验室，广东 广州 510380 ［摘要］ 目的：测定转红色荧光蛋白基因唐鱼的外源基因拷贝数。 方法：以杂合 代和杂合 代转红色荧光蛋白基 F5 F6 因唐鱼为材料，以其外源插入片段（ ）与基因组插入位点 侧翼区之间的边界序列作为特异性内参片 pDsRed－mylz2 5′ 段，同时以外源整合的红色荧光表达载体序列（pDsRed－mylz2 ）作为目的基因，采用实时荧光定量PCR 技术测定外 源基因整合的拷贝数。 结果：运用外源基因与特异内参在同批次实时荧光定量PCR 中的初始拷贝数比值，得到杂合 代和杂合 代转红色荧光蛋白基因唐鱼中插入的外源红色荧光表达载体序列 的拷贝数均值均为 F5 F6 pDsRed－mylz2 。 结论：转红色荧光蛋白基因唐鱼的外源基因拷贝数为 。 3 3 ［关键词］ 唐鱼；实时荧光定量PCR ；外源基因；拷贝数 ［中图分类号］ Q78 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1009－0002(2011)01－0061－05 Estimating the Copy Number of Exogenous Gene in Transgenic Tanichthys albonubes Expressing the Red Fluorescent Protein FAN Jia－Jia, BAI Jun－Jie, MA Dong－Mei, JIAN Qing Key Laboratory of Tropical and Subtropical Fish Breeding ＆ Cultivation, Pearl River Fisheries Research Institute, Chinese Academy of Fishery Sciences, Guangzhou 510380, China ［Abstract ］ Objective: To estimate the copy number of exogenous gene in transgenic Tanichthys albonubes express- ing the red fluorescent protein． Methods: The F5 and F6 generation heterozygous transgenic T．albonubes expressing the red fluorescen