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V01．27
第27卷增刊 质谱学报 Suppl．
2006年7月 ofChineseMass Jul．2006
Journal SpectrometrySociety
蛋白质靶上快速酶解与生物质谱鉴定技术
张祥民，于文佳，高明霞，邓春晖，杨芄原
(复旦大学化学系。生物医学研究院，上海200433)
Protein ofProteinsforFastMass
On—target Digestion Spectrometric
andIdentification
PeptidesMapping
ZHANG
Xiang-min，YUWen-jia，GAO Chun-hui，YANG
Ming-xia，DENG Peng-yuan
200433，China)
(DepartmentofChemistry，FudanUniversity，Shanghai
combinedwith wasstudiedasa
Abstract：On-targettryptiedigestion MALDI—TOF／TOF
and methodforthe andidentificationof foron—tar—
rapid simple analysis proteins．Conditions
for time，and of and
getdigestionoptimizedtemperature，diestionproportionproteintryp-
sin．A15minreactiontimeandat50℃and7—100：1of was
proteinVS．trypsinfinally
used．
Keywords：on-target MS
digestion；proteomics；MALDI-TOF／TOF
文献标识码：A
中图分类号：0657．63 文章编号：1004—2997(2006)增刊·165—02
目前，质谱尚不能对大多数分离的蛋白质进 管电泳分离数以千计的蛋白质馏分，在线点样到
行直接结构鉴定，通常采用蛋白质酶解方法得到 质谱靶板上，进而采用发展的快速靶板上酶解和
特定的肽段，再通过串级质谱和碰撞诱导断裂等 除盐技术进行批量酶解，随后通过MALDI-
TOF／TOF
技术获得肽段的氨基酸序列，进而鉴定、确认蛋 MS鉴定其中的蛋白质组分，获得了
白质序列结构信息。因此，蛋白质的高效、快速 从数百到数千种蛋白质不等的鉴定结果。
酶解一直是研究的热点技术。胶上酶解、溶液中
酶解有系统研究报道[1]，将酶固定在特定的载体 1 实验部分
材料上，对蛋白质进行在线或离线酶解有大量研 serum
(1)试剂：bovine
究工作
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