新型核壳型亲水聚合物-硅胶杂化填料的合成及其在蛋白质N-糖链富集中的应用.pdfVIP

20I5q-：3』J 色 谱 Vo1．33 N0．3 March 20l5 ChineseJournalofChromatography 22l～227 研 究论文 D0I：10．3724／SP．J．1123．2014．Il022 摘要 ：货rlI质 的Ⅳ一糖基化修饰 -j多种重要的生理 、病理进程密切相火 ，足多种重大疾病诊断标志物研究的热点。… 丁l栅 h小身多足低 F度表达 的蛋 门质 ，且精链结构具有高度微不均一性，这使得蛋F1质糖基化修饰的分析 彳丁 一 定 的挑战 。术研 究利 』}J表 引发一原子转 移 n [1】基 聚合 (SI—ATRP)法 ，以带 有舣键 的氨 基葡萄糖 为 体 (GMAG)，成功制备了新，鲤核壳 ，亲水聚合物一硅胶杂化填料 (pGMAG-SiO )。山于在砘胶丧 jl入致密 的亲水聚 合物 ，恢填料不仪保持 r硅胶 良好的机械强发 ， 且屁若提高 了』￡亲水性 ，因此非常适合作为亲水填料用于赁n 质 的Ⅳ一特链谢集。以麦 L糖干¨鸡卵清蛋 白的Ⅳ一糖链为研究对象 ，号察 _r该填料对 Ⅳ一精链 的寓集效果，并将 陔杂 化填料成功川 j：人m浆 II特篮 Ⅳ_精链 的富集榆测 ，共搭定 了 47种糖 。以上结果 明，pGMAG—SiO 填料对 Ⅳ 特链 钉较 岛的亲和一Iq-：，¨r以川于Ⅳ一糖链 的商{{={盖率搭定。 关键词 ：太 ，jl发一原 f-转移nih蟮聚合反应 ；核壳嘲硅胶填料 ；Ⅳ一精链 ；Ⅳ一糖基化蛋白质 中圈分类号 ：0658 文献标识码 ：A 文章编号 ：l000—8713(20l5)03—0221—07 Abstract：ProteinN—glycosylation isoneofthemostimportantpost—translationalmodifications closely correlated with many importantbiologicaland pathologicalprocesses．The structural alterationsofN—linkedglycansinglycoproteinsarealwaysassociatedwithmanydiseases，such asdiabetes，heart failureandmalignanttumors．Therefore，itisvery importanttoestablish sen— sitive methods for high—throughputN—glycan profiling．However，the low abundance ofthe N．-glycoproteinsandtheheterogeneityoftheN—·glycansmakeitachallengeto analysethepro—- tein glycosylation sensitively．Inthisw ork，wehad synthesized core—shellhydrophilicpolymer— silicahybridmaterials(pGMAG—SiO!)fortheefficientenrichmentofproteinN—glycans．Firstly， pGMAG—SiO!waspreparedbyinsitugrowthofglucosepolymeronthesurfaceofsilicam icrop— articlesusingsurface—initiatedatom transferradicalpolymerization (SI—ATRP)technique．The stronghydrophiIicityofthematerialmakesitsuitablefortheenrichmentofN—glycansreleased from