结肠肿瘤细胞凋亡途径和其在结肠癌靶向治疗中作用的初步研究.pdfVIP

平上系统、全面的分析肿瘤发生、发展、侵袭转移的分子机理。人大细胞肺癌细胞株NL9980币D L9981是具有相同的遗传学背景的同源细胞株，其中NL9980具有低转移性，L9981具有高转移性， 它们之间具有高度的可比性，是研究侵袭转移机制的良好模型，通过对细胞形态、生物学特性、 表达基因及蛋白差异等比较，可以探讨其与侵袭、转移的关系和作用机制。本研究旨在使用基因 芯片比较不同转移潜能的人大细胞肺癌同源细胞株NL9980和L998l的基因表达谱变化，初步探讨 不同转移潜能的人大细胞肺癌的基因表达特点及筛选转移相关基因，为肺癌的诊断、预后提供分 子生物学指标，并从整个基因网络水平对肺癌的侵袭转移机制进行初步探讨。方法提取并纯化 dTPrimer为引物反转录生成cDNA，然后经体外转录 NL9980和L9981细胞的总RNA，以Oligo HG U133Plus 2．0芯片杂交，经洗涤染色扫描后得到两个细胞的表达谱。应用GCOS软件比较两个细 胞株的差异探针，将得到的差异探针进行注释，分类，信号通路分析，从中筛选转移相关的基因 和信号通路。结果1．通过NL9980和L9981细胞株基因表达谱的对比发现两个细胞株的绝大部分 的基因表达和分布非常相似，从而也证实了两个细胞株是遗传背景相同的同源细胞株。2．NL9980 和L9981细胞株基因表达谱的差异探针1274条，有明确基因名称的基因970个，其中上调686个， 下调283个，1个的基因的两个不同转录本分别上调和下调。没有注释信息的探针90个，其中88个 为EST(ExpressedSequenceTag)序列，两个为芯片内对照探针。3．改变的基因主要涉及到的功 transducer 能分类为binding、catalyticactivity、signalactivit)r矛Wtranscriptionregulatoractivity。4．高 达。5．对差异基因进行信号通路分析发现其中242个基因有明确的信号通路，共涉及132个信号 通路，这些信号通路主要涉及细胞间及细胞与基质的黏附、细胞生长、分化及肿瘤形成。结论初 步完成对不同转移潜能人大细胞肺癌细胞株NL9980和L9981细胞株基因表达谱的分析，得到970 个差异基因和88个ESTs，主要涉及黏附、细胞生长、分化及肿瘤形成，从而为进一步探讨与侵袭 转移的机制奠定了基础。 【关键词】大细胞肺癌；基因表达谱；转移；生物信息学 结肠肿瘤细胞凋亡途径 ＼≤其在结肠癌靶向治疗中作用的初步研究 陈乃玲1 陈昊2 白玲2张昶2赵文海2 1北京军区总医院肝病研究所，北京100700： 2徐州医学院附属连云港医院江苏省连云港市222002 通讯作者：白玲Bailing一1968@hotmail．corn 基金项目：江苏省连云港市社会发展项目基金(SH0601) 【摘要J 目的了解结肠肿瘤细胞凋亡途径并探讨其在分子靶向治疗中的价值。方法应用免疫组 白细胞色素CmRNA在结肠癌(肠癌组)56例、结肠腺瘤(腺瘤组)18例及正常结肠黏膜(正 常组)1 达程度采用半定量积分法。 并对其中4例结肠癌、6例结肠腺瘤以及7例正常肠黏膜细胞线粒体 进行了超微结构观察。 结果肠癌组、腺瘤组及正常组的阳性表达在肠癌组与正常组及肠癌组与 异有统计学意义。结肠癌Dukes 统计学意义。且DukesD期有50．00％呈高表达。细胞色素CmRNA在肠癌组、腺瘤组中的表达 阳性率分别为93．3％、73．7％，二者比较差异无统计学意义。肠癌组细胞色素CmRNA阳性率与 性别、年龄、肿瘤大小、组织学类型及Duckes分期等因素比较，差异也无统计学意义。但随着结 肠癌分化程度的升高，阳性表达也逐渐升高；低、中、高分化结肠癌阳性表达率次第为87．5％(14／16 C 布不均，基质不均，嵴发育不良且分布不均，少数线粒体膜破裂，但内质网结构良好。腺瘤组大 部分细胞线粒体丰富，规则，卵圆形，大小较一致，嵴发育良好，但基质不均，少部分线粒体嵴 有断裂。正常组线粒体嵴发育良好，基质均匀，少部分线粒体嵴有断裂。粗面内质