纳米给药系统细胞动力学研究.pdfVIP

2008令园纳米生物’j医学学术会议(天日湖)论文摘要集 纳米给药系统的细胞动力学研究 A ofcellularkineticsof comparativestudy nanOCarrlerS 孙晓译，梁文权(新江大学药学院，杭州，310058) 为观察亲脂性药物纳米载体的细胞转运过程、研究细胞动力学行为、考察处 方隰素对载体转运的影响，指导具体药物载体的选择和设计。本研究选用了亲脂 性荧光染料6一番甄素为模型药物，制各了腊质体、聚乳酸一乙醇酸共聚物(PLGA) 纳米粒、亚微乳、磷脂混合胶束五种纳米载体，考察了血清对其粒径、电位和药 物释放的影蛹。剃用6。香豆素荧光淬灭试剂比较了不屈载体的细胞膜吸附和细胞 内化差异，并定量研究了人宫颈癌HeLa细胞对不同载体的摄取及消除过程，结 合胞内分布影像资料，总结了细胞消除动力学规律。考察了给药浓度、载体类型 对细胞内化的影酶，特别是对处方因素对亚微乳细胞摄取的影响进行了磷究。最 后，以紫杉醇为治疗药物，使用MTT法比较了几种载体的抗肿瘤活性。 结果表明，几种纳米载体的电位均受血清不同程度的影响，其中以阳离子乳 剂为最，Zeta电位发生逆转。艏质体和磷脂混合胶柬的粒径分布峰发生分裂，阳 离予乳滴发生聚集，阴离子乳剂和纳米粒粒径贝l』不受影响。血清造成药物泄漏和 释放可忽略。所有制剂内化与吸附量比值1～1．85范围内。纳米粒、脂质体内化 较完全，与溶液缓、翳离子乳剂、阳离子乳荆耀比均有显著性差异(除脂质体对 溶液组p0．05外，其余p0．01)。溶液和混合胶束组其次。乳剂组容易停留在细 胞外部，阴离子乳剂和阳离子乳剂无显著性差异。细胞摄取实验中，混合胶束的 入胞速度显著高予其它载体(940。8 ng／pg·protein×h。)、溶液(583．4 neC肛g·proteinxh。)，摄取速度最慢的是纳米粒(57．9 ng／p．g-pmteinxh。)。相应的， to．95最大与最小者为纳米粒和港合胶柬；投据模型计算达平台后各载体的整体细 胞摄取量最多的是脂质体和混合胶束，溶液和纳米粒近似，含量最低的是普通乳。 阳离子载体可促进细胞摄取，此作用在低浓度时无法体现。载体稀释后，各制剂 缨麓摄取总量排序发生变化，阴离子乳骞|』和混合胶柬的摄取大幅提高，乳剂、胶 柬、脂质体摄取水平大致相同，溶液组的细胞药物水平最低。大豆油、中链甘油 2008会离纳泶生物’j茨学学术会议(灭强潮论文摘要焦 三酯和油酸三种油相对亚微乳细胞摄取无显著影响。不使用助乳化剂poloxamer 188的甄微乳可较普通乳裁提高摄取水平，Tween80对摄取影响不大，丽含 Cremophor-EL的亚微乳则摄取显著下降。 各类6．香豆素载体的细胞消除过程中前45rain是细胞外排快速期，超过50 ％的药物被清除，后面的数个小时细施持续消除，但速度明显减慢。其中，吸附 药物5min内大量被洗脱，以后的时间段内洗脱缓慢趋于平台，表明有部分药物 较牢固地结合在细胞表面，不易被消除。而胞内药物的外排相对持久，通过小泡 运输载体，并通过缨胞貘辨排的过程呈时间依赖。细胞消除过程符合二室模型消 除，分快消除相和慢消除相。快消除速率常数0【以溶液最大，其余载体从大至小 依次为混合胶束、纳米粒、脂质体和阴离子乳剂。慢消除速率常数B中胶束组为 大，其次为脂质倦和PLGA纳米粒，阴离子乳荆§最小。综合程和多，爱离子乳 剂的外排速率常数最小，有延缓药物快速外排的作用。阴离子乳剂很可能在细胞 内部发生了结构变化，药物与载体材料以结合的形式停留在细胞内部。引起细胞 两相消除的主要原医是药物在缨胞内的分布差异。通过显微镜观察，各种载体除 在胞浆中均匀分布外，在核周均有明显的荧光聚集。 药物紫杉醇脂质体和亚微乳稀释倍数大时，乳剂组的抗肿瘤活性最大；稀释 倍数小时，溶液组和脂质体的细胞毒性优于乳裁组，这于6．香豆素的细胞摄取动 力学结果一致。 本文较全面地研究了载有6。香豆素的几种常用纳米载体的细胞转运过程，并 以药效学试验初步证实了动力学研究结果。发现溉微乳、脂质体、PLGA纳米粒、 磷脂混合胶束与溶液在细胞摄取动力学及消除动力学上均有差异。制剂因素对亚 微乳的缨