JNK信号转导系统在去甲斑蝥素诱导肝癌细胞凋亡中作用.pdfVIP

结论： ①体外细胞培养研究表明，去甲斑蝥素可抑-和]SMMC-7721的增殖，其抑制作用具有一定时间和剂量 依赖性。 ②去甲斑蝥素可诱导SMMC-7721凋亡。 ③SMMC-7721细胞中的NF—rd3通路可以被去甲斑蝥素抑制，进而加速肝癌细胞的凋亡。 JNK信号转导系统在去甲斑蝥素诱导肝癌细胞 凋亡中的作用 河北医科大学第二医院消化内科崔东来 河北体育学院陈卫 【摘要l肝细胞肝癌(hepatocellularcarcinoma，HCC)是世界上常见的恶性肿瘤之一，目前在肝癌的治疗 中还存在早期诊断困难，根治性切除机会小，复发转移率高，对放化疗不敏感，总体疗效欠佳的现状。去甲 斑蝥素(norcantharidin NCTD)是斑蝥素的化学结构中去除1，2位甲基人工合成而得的衍生物。临床上 主要用于食管癌、胆管癌及乳腺癌等的治疗，尤其在肝癌中的治疗效果较好。有实验研究认为NCTD可 以通过诱导肝癌细胞的凋亡起到抗肿瘤的作用，但其引起凋亡的具体机制尤其是哪些信号转导通路参与其 中尚有待进一步阐明。其中c—Jun氨基末端激酶(c—JunNH2-teminalKil[1ase，瞅K)信号转导通路与核转录因子 一kappa 验研究，探-}．-]-NCTD对肝癌细胞增殖和凋亡影响及JNK与NF一cB信号转导通路在其中发挥的作用。 目的：本实验主要通过不同浓度的NCTD干预体外培养的人肝肝癌细 胞SMMC．772l，研究其对活化的肝癌细胞增殖及凋亡的影响；以及JNK 与NF-MB信号转导通路在其中可能的作用机制。 方法：应用MTT法检测NCTD对活化的肝癌细胞增殖的影响； 检测JNK、p-JNK、NF—xBp65及IMBct蛋白表达。 结果：1．去甲斑蝥素对SMMC一7721增殖的影响：MTT法检测细胞增殖 48h与各时间对照组相比A492值明显降低，对照组的A492值总体均数与不同浓度的去甲斑蝥素组的 差异有统计学意义(P0．05)；不同时间与浓度的去甲斑螯素的作用对肝癌细胞的抑制率具有一定的时间和 剂量依赖性。48h时抑制最强且IC50约为40卜g／rnl。 2。去甲斑蝥素对SMMC一7721凋亡的影响。 一 (I)Hoechest 33342染色荧光显微镜下检测细胞凋亡形态显示：对照组细胞大小均匀，NCTD干预 螯素对肝癌细胞有促进凋亡的作用，且与药物作用时间有关，作用时间越长凋亡率越高，12h开始增高 (11．2％±0．20％)，48h明显增多(34．13％±1．00％)。 素的促凋亡作用。 ， 3以Western 断ⅢK信号转导通路情况下的表达情况。 ‘3．1结果显示，无DMSO组与对照组间各蛋白表达灰度值无明显差异 1 的作用中使肿的活化增加，而SP600125可有效抑制NCTD对其的活化。 ， 3．3 意义(P0．05)。NCTD在对SMMC．77213 促进活化的作用。 结论： ‘ 1体外细胞培养研究结果表明，去甲斑蝥素可抑制活化SMMC．7721细胞的增殖，、‘其抑制作用具有一 定时间-剂量效应。 - 2去甲斑蝥素可诱导SMMC-7721细胞凋亡，且其在促进细胞凋亡中具有一定的时间与剂量依赖性。 _EJNK通路对NF—xB有一定抑制效应，二者相互作用，共同调控着细胞的凋亡 一