肌注与基因枪轰击小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在小鼠体内表达时相的比较研究.pdfVIP

中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 1．7结果的判定免疫组化结果判断标准：按照光学显微镜视野下观察到的特定细胞经染色后棕黄色显色 的有无、数量、种类及深浅来判定，光镜下阳性部位或细胞为棕黄色颗粒。判定标准为：“一”未见阳性细胞； ‘‘①’阳性信号偶尔可见；‘‘《驴’1个视野内见有I．5个阳性细胞；“《驴1个视野内见有5个以上阳性细胞。 2实验结果 2．1 d三组均最先在免疫部位肌肉中的细胞核中检测到棕黄色 A、B、C组中免疫组化结果免疫后l wk后棕黄色阳性颗粒的数量逐渐下降，9wk在A、B、 阳性颗粒，2wk棕黄色阳性颗粒的量最多，4 wk C三组均检测不到棕黄色阳性颗粒；免疫后1w|注三组肾细胞细胞核中检测到棕黄色阳性颗粒，2 检测到棕黄色阳性颗粒最多，4wkA、B、C三组均检测不到棕黄色阳性颗粒；免疫后1wk在三组心 肌细胞中检测到棕黄色阳性颗粒，2wk棕黄色阳性颗粒最多，4wI【三组中可见很少的棕黄色阳性颗 粒：在免疫后1wk．2、Ⅳlc艺间肝细胞细胞核可检测到棕黄色阳性颗粒但数量很少。在同一时候点和同 一组织中，棕黄色阳性颗粒的数目A组B组C组。三组中其他组织脾、肺、脑、肠、胃各时间点均 未检测到棕黄色阳性颗粒。 2．2 D、E组中免疫组化结果D组(空载体)和E组(PBS)对照组各组织细胞核中均未检测到棕 黄色阳性颗粒。 3讨论 3．1 基因疫苗在不同组织器官结构中的表达规律 除了免疫部位肌肉，还可以检测到少量表达产物的组织还有心、肝、肾，这些组织表达持续的时间 都比在免疫部位肌肉中时间短，表达产物的量也得多，可见肌肉注射免疫小鼠表达的主要器官在免 疫部位肌肉中。与其它器官相比，骨骼肌的细胞均有T管和细胞膜穴样内陷结构且具有多核的特点。 这些特性使骨骼肌细胞对所摄入的基因疫苗具有更大的持久允许性，因而其表达更为持续稳定。 3．2不同免疫剂量对基因疫苗在器官与组织中表达的影响许多研究资料表明，通过肌肉注射的方 式，基因疫苗的免疫剂量与其在组织中含量、存留时间和表达有密切的关系。Ray等以表达狂犬病 病毒G基因质粒免疫小鼠，然后以强毒攻击，结果接种100昭组获得100％保护，0．1岖组保护率 (200“∥只)B组(100¨g／只)C组(50 注射方式免疫，基因疫苗的免疫剂量与其在组织中的表达量有一定的正相关性，肌肉注射基因疫苗 的剂量越大，相应的基因疫苗在组织中的含量和表达量也越大。 参考文献(9篇，作者略) 肌注和基因枪轰击小鹅瘟病毒VP3基因疫苗在小鼠体内表达时相的比较研究 刘晓东L2，汪铭书’∥，程安春11．2y，韩新锋L2，卢菲L2，黎敏L2，陈孝跃1．2 (1．四川农业大学动物医学学院禽病防治研究中心，四川雅安625014；2．动物疫病与人类健康四川省 摘要：将小鹅瘟病毒(GPV)VP3基因疫苗(pcDNA-GPV-VP3)分别以每只2001．tg、100鹏、50pg 肌肉注射和6pg、3嵋，l¨g基因枪轰击的方法免疫六组BALB／c小鼠，通过免疫组织化学法检测 免疫部位肌肉、肾和肝细胞细胞核中被检测到，基因疫苗的剂量和表达产物的量呈现一定的正相关 性；基因枪轰击三组中，表达产物在心，免疫部位皮肤、肾和肝细胞细胞核中被检测到，基因疫苗 207 中国畜牧兽医学会动物微生态学分会第四届第九次学术研讨会论文集(下册)(2008年河南新乡) 的剂量和表达产物的量呈现较弱的正相关性．研究表明：肌肉注射和基因枪轰击都是 肉注射先检测出表达产物且持续时间长，表达量多，基因枪轰击免疫要优于肌肉注射免疫． 关键词lGPV-VP3基因疫苗；肌注；基因枪；BALB／c小鼠；免疫组织化学 onthe of vaccineinmice GPV-VP3 ComparedStudy dynamicexpression gene afterinfus