骨关节炎发病的分子机制和其基因治疗的实验研究.pdfVIP

·36· 2008国际骨科学术研讨会暨北京大学第三医院骨科成立五十周年庆典 骨关节炎发病的分子机制及其基因治疗的实验研究 stlIdiesonmolecularmechanismand ofosteoarthritis Experimental genetherapy 娄思权等 北京大学第三医院骨科100083 骨关节炎(Osteoarithritis，OA)是一种以关节软骨进行性退变为主要特征的老年性常见病，引起严重 的疼痛和关节功能障碍。在美国50岁以上的人群中，OA的发病率仅次于冠心病，居第二位。国内关于OA 的调查也得出类似的结果。随着年龄的增加，OA的发病率显著提高。因而0A严重地威胁着人类的健康 与生存质量。随着社会的发展，人类寿命的延长，社会已进人人口老龄化时代；同时，随着现代生活节奏 的显著加快，骨关节炎的发病也明显呈现年轻化的趋势。因而，这一问题日益突出。如何防治OA的发生 与发展，成为现代医学急待解决的课题。为引起国际社会对骨关节炎的关注，wHO把2000年。2010年确 定为国际“骨与关节十年”，以推动骨关节炎研究的发展。 由于0A的病因尚不清楚，OA的临床治疗仅停留于控制症状、缓解疼痛，缺乏特异性的治疗措施， 对其发展束手无策。阐明0A的病因及其发病机制，是0A有效预防与治疗的根本基础与前提。但是，目 前其病因的研究多集中于生物力学及组织学方面，分子生物学机制方面的研究则刚刚起步，严重地制约 着0A预防与临床治疗的发展。 该成果通过基因克隆、细胞培养与动物实验，应用分子生物学等方法，分别从基因、细胞与大体三 个水平，从细胞因子、凋亡与衰老等三个环节，对0A发病的分子机制及其基因治疗进行了系统的研究。 1．详细科学技术内容 成果“骨关节炎发病的分子机制及其基因治疗的实验研究”通过基因克隆、细胞培养与动物实验， 分别从基因、细胞与整体三个水平，从细胞因子、凋亡与衰老三个环节，对OA发病的分子机制及其基 因治疗进行了系统的研究。 该成果包括2个方面、7个部分： ◆OA发病的分子机制 凋亡相关基因PDCD5在人OA软骨细胞中的表达上调及意义 趋化素样因子l(CKLFl)对关节软骨细胞的影响 衰老基因p16INKta在软骨细胞中的表达及意义 IL—l、TNF一0【损伤关节软骨的机制及NOS在0A软骨细胞中的表达 ◆OA的基因治疗 IL—l 0对软骨细胞具有直接保护作用 IL一10基因转染对OA动物模型骨关节炎发生与发展的影响 p16眦·a特异性siRNA转染对人OA软骨细胞p16INK·a的表达与衰老表型的影响 1．1总体思路、技术方案与研究成果 本课题通过基因克隆、细胞培养与动物实验，应用组织学检查、电镜扫描、同位素标记检测、流式 Blot、Southem Blot、RT—PCR、基因重组、基因 细胞技术(FCM)、免疫组化(IHC)、原位杂交(ISH)、western 转染、基因沉默等方法，对OA发病的分子机制和基因治疗进行系统的研究： 论文集 PDF文件使用”pdfFactoryPro”试用版本创建叠!：￡in旦Qrin羔：￡Q也：如 1．1．1 OA发病的分子生物学机制 (1)凋亡相关基因PDCD5在人OA软骨细胞中的表达及意义 凋亡是多细胞生物体有核细胞在基因控制下、依赖ATP供能、遵循自身程序而发生的自然死亡过程， 又称程序性死亡，是保证机体发育成熟、维持正常生理功能、维持机体内环境稳定所必需的一种生理现