过氧化氢酶的研究和固定化及其应用进展.pdfVIP

安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2014，42(34)：12035—12038 责任编辑 刘月娟 责任校对 李岩 过氧化氢酶的研究和 固定化及其应用进展 徐娟，常雁红 ，罗晖 (北京科技大学，北京100083) 摘要 过氧化氢酶作为一种抗氧化剂广泛存在于各类生物体 中，也被应用于纺织废水、食品、工业酶催化等 多个领域。在工业应用 中， 为了提高过氧化氢酶的催化效率、稳定性、操作稳定性 ，通常会对其进行固定化。该研究论述了过氧化氢酶的结构、特点、纯化方式、固 定化和应用方面的研究进展 。 关键词 过氧化氢酶；固定化；应用 中图分类号 S182 文献标识码 A 文章编号 0517—6611(2014)34—12035—04 TheProgressofCatalaseand ItsImmobilizationwithApplication XUJuan，CHANG Yan-hong ，LU0Hui (UniversityofScienceandTechnologyBeijing，Beijing100083) Abstract Asonekindofantioxidant。cata]asecanbeofundin almostal】organismsandhasbeenused in variousfields，such astextile wastewater，ofodandenzymecatalysisindustries．Inordertoincreasethecatalyticefficiency，stability，usabili~ inreactorsforindustrialap— plication，thecatalaseoftenwasimmobilized．The structure，sources，pufific~ionmethods，immobilizationandapplication ofcatalasewere discussed． Keywords Catalase：Immobilization；Application 过氧化氢酶(CAT，1．11．1．6)广泛存在于古生菌、细菌、 不同应用条件的过氧化氢酶成为研究热点。 真菌、植物和动物体中。它作为一种抗氧化酶起着非常重要 Furuta等 在 1990年首次报道了以大肠杆菌为宿主构 的作用，可 以高效地将 HO：催化成水和氧气这2种无害的 建产过氧化氢酶的基因工程菌，基因来源是小 鼠肝脏细胞， 物质，具有清除生物体 内自由基、保护细胞免受损害等作用。 但获得的产量不高，仅为总可溶蛋 白的0．1％。为了获取产 同时，过氧化氢酶还能对血红蛋白及其他含巯基蛋白质起到 酶量高的过氧化氢酶重组菌，人们开始尝试不同来源的过氧 保护作用 ，使它们不被氧化…。由于该酶具有高效催化性 化氢酶基 因和不 同表达宿主。1997年 Nagy等 将结核分 能，它也被广泛应用于酶催化体系、生物传感器、纺织和食品 枝杆菌中的过氧化氢酶基因克隆并导人大肠杆菌 ，所得过氧 领域。 化氢酶蛋 白量为总蛋白量的30％。2008年又有研究者将嗜 1 过氧化氢酶的来源 冷杆菌中的过氧化氢酶基因克隆导人到大肠杆菌中，重组菌 过氧化氢酶的研究可以追溯到100多年前。最初Thenard 酶活可到达 11000U／rnl，产率为458U／(ml·h) 。张兴 发现了动植物组织可以分解过氧化氢，产生氧气。1892年Ja_ 群等 发现 ，来源于微球菌的过氧化氢酶(CAT)比活高，因 cobson证明了过氧化氢酶的存在。后来经过人们的不断努力， 此将含微球菌过氧化氢酶基 因的重组表达质粒 pProExHT— 不仅考察其化学滑陛，而且对其活性中心、活性基团进行深入 CAT导入大肠杆菌BI21(DE3)中，构建工程菌 BL21(DE3)／ 的研究，并从牛肝中分离得到过氧化氢酶的结晶 。1948年 pProExHT—CAT，并且优化其培养条件，在相同实验条件下以 Herbert和Pinsent第一次从藤黄微球菌中获得原核过氧化氢 野生菌酶为对照，重组酶