三七总皂苷抗细胞凋亡作用和MIF%2fAMPK的关系研究.pdfVIP

三七总皂苷抗细胞凋亡作用与MIF/AMPK 的关系研究 1,2 1.2 1 1 1 1 1 1 陈少贤 ，刘居理 ，刘晓颖 ，林秋雄 ，麦丽萍 ，朱杰宁 ，单志新 ，余细勇 ， 杨敏1* （1. 广东省人民医院医学研究中心 广东省医学科学院，广州 510080；2. 汕头大学医学院 汕头 515041） 【摘要】目的 我们前期的研究表明PNS 能够抗SGOD 诱导的H9c2 细胞凋亡， 本论文我们将探讨PNS 抗缺血诱导的心肌细胞凋亡的可能作用机制。方法 将 H9c2 control model PNS control 心肌 细胞株分为正常对照组（ ），模型组（ ）和 组。 组采用含10%FBS 的DMEM/F12 培养基于普通二氧化碳培养箱培养，model 组 采用无糖无血清培养基培养并缺氧（serum, glucose and oxygen deprivation SGOD）处理诱导细胞凋亡，给药组按照model 组方法处理的同时给予2.25g/L PNS。DCFH-DA 荧光探针检测细胞内活性氧的水平，JC-1 检测线粒体膜电位， Annexin V/PI 染色检测细胞凋亡率，Western blot 检测MIF，AMPK 和磷酸化 AMPK（p-AMPK）以cleaved caspase-3 蛋白的表达水平。结果 JC-1 染色结果显 PNS DCFH-DA PNS ROS 示 能够稳定线粒体膜电位； 染色结果表明 能够降低胞内 水平，具有抗氧化的作用；Annexin V/PI 染色显示MIF 拮抗剂ISO-1 显著逆转 PNS 抗细胞凋亡的作用；Western blot 结果显示SGOD 处理后能够明显的升高胞 内活化caspase-3 蛋白（cleaved caspase-3）的表达水平，同时升高MIF 和p-AMPK 蛋白的表达水平，而PNS 能够显著的降低cleaved caspase-3 的蛋白水平，并进一 P P 步促进MIF 和p-AMPK 蛋白的表达。 结论 PPNS 能够抗线粒体途径介导的心 肌细胞凋亡，其抗凋亡的机制与激活MIF/AMPK 有关。本研究将为进一步探讨 PNS 保护心脏的分子机制及将PNS 更好地应用于临床治疗提供有意义的实验依 据。 PNS, ψm MIF p-AMPK 【关键词】 凋亡，心肌缺血，△ ， ， Objective Objective 【Abstract】OObbjjeeccttiivveeWe had demonstrated that PNS could protect H9c2 cells from apoptosis induced by SGOD. In this paper we will investigate the potential Methods Methods mechanism involved in the protective effect of PNS. MMeetthhooddss H9c2 cells were divided into normal control group,