慢性间歇低氧对幼鼠学习记忆的影响和其机制.pdfVIP

后测序确认，进一步说明了该基因芯片技术的准确性和可靠性。 为阐明PCR．基因芯片技术在诊断人疱疹病毒感染时的临床应用价值，本文通过病案检索，了解 患儿疾病的实际情况。发现多数病例临床诊断或症状支持基因芯片检测结果，部分病因或诊断不明 确的病例，基冈芯片技术则可为其病因的明确提供有效手段。人疱疹病毒感染常可引起机体多系统 多器官的损伤，且症状和体征常无特异性，给疾病的诊断带来一定困难，将基因芯片技术应用于儿 童血、脑脊液标本中多种人疱疹病毒的检测及基因分型，具有快速、特异、并行的特点，可为临床 早期、准确诊断人疱疹病毒的感染提供有效方法。 慢性间歇低氧对幼鼠学习记忆的影响及其机制 蔡晓红周永海 张存雪 胡良岗 龚永生 温州医学院附属第二医院、育英儿童医院(325027) 儿童睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructivesleepapneahypopnea 率约2％。OSAHS对全身各系统都有很大的影响，临床已有研究报道OSAHS患儿存在一定程度的 执行能力、注意力、记忆力和言语能力下降。受伦理因素所限，临床研究很难深入探讨OSAHS引 起学习记忆损害的具体病理生理机制，而目前尚缺乏一种能完全模拟人类OSAHS特征的动物模 型。 Debiec J等认为，海马在新信息的获得和巩固并转为长时记忆的过程中具有重要作用，而海马 是脑组织中对低氧最为敏感的区域之一。有研究表明，受持续缺氧冈素刺激后，P38MAPK的强烈 激活可导致神经细胞凋亡，加重学习记忆损害，本研究拟通过建立能最大限度反应OSAHS病理生 理特征的慢性间歇低氧动物模型，以八臂迷宫测定不同阶段幼鼠学习记忆力，电镜观察海马超微结 构的改变，并检测血清8-ISO．PGF2。、海马的P38MAPK mRNA和p-P38蛋白的表达，从氧化应激 及细胞信号转导角度探讨慢性间歇低氧所致认知功能损害的机制。 材料和方法 l 材料 心病研究室提供：H．7500型透射电镜；八臂迷宫(温州医学院附属二院麻醉科)。兔抗鼠磷酸化 P38MAPK单克隆抗体、内参all3．tublin及羊抗兔二抗(CellSignalTechnology公司)。 2方法 59 2．1 建立模型 随机取10只上述SD幼鼠作为低氧4周后恢复组(4F组)，其余46只进行八臂迷宫训练，其中6只 因不能完成迷宫训练或绕臂被排除，训练成功幼鼠随机分为四组：间歇低氧2周组(2IH组)、间歇低 部分为玻璃，方便观察：侧壁上有4个进气的单向阀，4个排气的单向阀，这样舱内压力可以始终保 持常压。各舱上面均盖厚布，使舱内保持黑暗，模拟夜间睡眠状态，每天出舱后幼鼠置于日光灯下， 模拟白天。实验时活动、饮食均不限，整个实验结束前则使幼鼠保持饥饿状态以便进行迷宫检测。 流量通氧气12s，停18s，此为一个循环，舱内低氧时氧浓度在9．O％±1．5％，复氧时氧浓度在21．0％± 周7天。在停止通气阶段由连接的测氧仪分别测间歇低氧舱内的氧浓度高值、低值和二氧化碳浓度， 前三组幼鼠放入间歇低氧舱内。对照组则置于同等条件下的空气模拟对照舱，通压缩空气，氧浓度 保持在21．O％±0．5％，同一单片机程序控制。 2．2八臂迷宫行为学检测及取材 参照ZouLB等方法进行训练，训练前先将幼鼠饿至原体重的85％左右，此后在训练过程中保 持该体重。然后迷宫中适应两天，每天一次。适应后进行每天两次的训练。每次训练中，八臂中只 有四臂放置了饵(分别时3，5，6，8号臂)，整个实验过程均维持此顺序。幼鼠放在迷宫中央区，用一 小塑料桶盖住，15秒后提起塑料桶放出幼鼠，幼鼠可选择进入任意一臂，以摄取饵。幼鼠进入有饵 的臂且摄取了饵为一次正确选择，否则为错误选择。重新进入放饵臂称为工作记忆错误(working error,WME)，第一次进入不放饵臂称为参考记忆错误(reference memory 之和为总记忆错误(totalmemoryerror,TE)。连续5次训练错误选择次数为1次或1次以下，同时 WME必须为零，认为训练成功。 电镜标本。其余幼鼠取血后迅速断头处死，于冰上快速分离出海马置液氮保存。 2．3 血清8一ISO．PGF2Q测定 用CurveExpertI．38软件绘制标准曲线，计算各孔8-IS