瓜类嫁接亲和性研究.pdfVIP

黑龙江农业科学 2014(11)：85～87 HeilongjiangAgriculturalSciences 瓜类嫁接亲和性研究 刘 芬 。向长萍。 (1．遵义职业技术学院，贵州 遵义 563000；2．华 中农业大学 园艺林学学院，湖北 武汉 430000) 摘要 ：为探索瓜类嫁接亲和力，以中国南瓜 57自嫁 苗、黄瓜 品种津春 四号 自嫁苗以及津春四号 ／中国南瓜 57 嫁接苗为材料 ，观察嫁接后不同时期愈合部位组织结构并进行基 因差异表达分析。结果表 明：津春 四号黄瓜 自嫁苗的愈合速度快于 中国南瓜 57自嫁苗以及津春四号 ／中国南瓜 57嫁接苗 。不 同时期南瓜 自嫁苗愈合部 位 的cDNA—AFIP结果分析表 明，特异性带均 出现在嫁接后第6天取样 的材料 中。 关键词 ：瓜类 ；砧 木；嫁接亲和 力 中图分类号 ：$642 文献标识码 ：A 文章编号 ：1002-2767(2014)11—0085—03 嫁接可实现提早收获[1]、延长生育期 、提高产 日浸种中国南瓜 57(砧木用)，9月 10日浸种中国 量的 目的 -。嫁接后 能否成活 ，受 多种 因素 的影 南瓜 57(接穗用)，9月 12 日浸种津春 四号黄 响 ，而最重要 的因素是嫁接亲和力 的强弱 。关于 瓜 (接穗用)，9月 16日采用插接法嫁接。嫁接组 嫁接亲和性机理 的研究大多停 留在生理生化方 合包括 ：Z：中国南瓜 57自嫁苗，H：津春四号 自嫁 面 ，在分子生物学方面 的研究较少 。该试验通过 苗 ，T：津春四号 ／中国南瓜 57嫁接苗 。9月 17日 石蜡切片对瓜类嫁接后 的解剖结构进行观察 ，并 开始 ，每隔 1d取样 1次 ，取样部位为嫁接愈合 通过 cDNA—AFLP技术对不 同时期南瓜 白嫁苗 处 ，每次随机取 20株，磨碎混匀后提取 RNA，取 愈合相关基因进行 了差异表达分析，为 以后的嫁 4株固定后制作石蜡切片观察其解剖结构。 接亲和性 的研究提供一定的理论依据。 1．2．2 RNA 提取及双链 cDNA 的合成 RNA 1 材料与方法 提取参照 TRNzol—A 总 RNA提取试剂盒说 明 书进行。双链 cDNA的合成采用 TaKaRa的M— 1．1 材料 MLV RTasecDNA SynthesisKit试剂盒 。 供试材料为黄瓜品种津春 四号 ，由天津科润 1．2．3 cDNA—AFLP差异 分析 cDNA—AFLP 农业科技股份有 限公司黄瓜研究所选育 ，多代 自 参考 PieterVos等方法进行，PCR产物在 6 的 交品系中国南瓜 57，由华中农业大学瓜类研究课 聚丙烯酰胺凝胶上进行 电泳检测 。将得到的双链 题组选育 。 cDNA经 EcoR工和 丁nq工酶切后 ，连接接头 ，产 1．2 方法 物取 5 L进行预扩增 。预扩产物稀释 30倍后进 1．2．1 试验设计 试验于 2008年 9～10月在国 行选择性扩增 。共采用 64对引物对 5个样品分 家蔬菜改 良分中心和教育部园艺系重点实验室进 别进行了差异显示分析 ，接头与引物见表 1。 行。9月 2日浸种津春 四号黄瓜 (砧木用)，9月 5