枸杞多糖对D-半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的基因表达谱的影响.pdfVIP

第47卷 第 5期 复旦 学报 (自然科学版) V01．47No．5 2008年 l0月 JournalofFudanUniversity(NaturalScience) Oct．2008 文章编号：0427—7104(2008)05—0639—06 枸杞多糖对 D一半乳糖致亚急性衰老模 型小鼠的基 因表达谱的影响 杨 圣 ，董俊杰2，姜振玲2，陈 沁2，付旭平 ，李 瑶 ，顾少华 (1．复旦大学 生命科学学院遗传学研究所 遗传工程国家重点实验室，上海200433； 2．联合基因科技有限公司，上海200437) 摘 要：为了探讨枸杞多糖对 D一半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的药理作用，利用 Illumina基因芯片研究使用枸 杞多糖灌 胃的衰老模型小鼠的基因差异表达情况．实验表明D一半乳糖诱导的亚急性衰老模型是可靠的衰老实 验动物模型．通过分析找到了枸杞多糖在延缓衰老、抗氧化、降血糖、调节免疫、抗肿瘤、降血脂等方面有影响的 相关基因． 关键词：枸杞多糖；D一半乳糖亚急性衰老模型；Illumina基因芯片；基因的差异表达 中图分类号：R3 文献标识码：A 枸杞作为传统中药，已有几千年的药用历史，现代临床广泛用于降低血脂血糖、保肝、抗肿瘤、抗衰老 等．一般认为其主要有效成分为枸杞多糖 (Lyciumbarbarumpolysaccharide，LBP)． 枸杞多糖有抗氧化、延缓衰老的作用．枸杞多糖可直接清除体内过多的自由基 ：O·H[¨，也可通过提高 动物的抗氧化酶活力来间接清除自由基l2-7J．枸杞多糖有 良好的降血糖作用，可能与提高胰岛SOD活性、 降低一氧化氮合酶(NOS)活性有关 8．枸杞多糖有较强的免疫调节作用：能促进正常小鼠胸腺和脾脏的重 量的增加}33I，降低老年大鼠T细胞的过度凋亡L9J，显著提高荷瘤小 鼠NK细胞活性 1【0J，提高荷瘤鼠胸腺 指数等l11J．枸杞多糖具有明显的抗肿瘤活性，提高荷瘤鼠免疫功能是其抑制肿瘤效应的机制之一[10-12]． 此外，枸杞多糖可引发细胞周期静止在 s期 ，提高胞内Ca2浓度[j或通过调节Bcl一2／Bax蛋白的表达[H] 而诱导肿瘤细胞的凋亡．枸杞多糖还有 良好的降血脂作用 55【l． 衰老的代谢学说认为衰老是机体代谢性障碍的结果．连续给动物注射大剂量的D一半乳糖，在醛糖还 原酶的催化下，还原成半乳糖醇，这种物质不能被细胞进一步代谢而堆积在细胞内，影响正常的渗透压，导 致细胞肿胀、功能障碍、代谢紊乱，最终导致衰老的发生I15J． Illumina激光共聚焦微珠芯片是 目前最前沿的芯片技术，其中基因组表达芯片可以用于人、小鼠、大 鼠等全基因组的表达的研究．我们这次所用的小鼠全基因组表达谱芯片可检测47000个以上基因以及 E 片段． 以往针对枸杞多糖的研究主要是在动物水平或细胞水平，在分子层面上，只针对个别基因进行了研 究，还未见全基因组的表达谱分析．为此，我们探讨枸杞多糖对D一半乳糖致亚急性衰老模型小鼠的药理作 用，从全基因组角度分析基因差异表达情况． 1 材料和方法 1．1 材料 衰老模型小鼠共25只，由第二军医大学实验动物中心提供．D一半乳糖由上海捷倍思基因技术有限公 收稿 日期：2007—01—28 作者简介：杨 圣 (1983一)，男 ，硕士研究生；通讯联系人顾少华，男，副教授，Email：shaohuagu@fudan．edu．cn 复 旦 学 报(自然科学版) 第47卷 司提供．枸杞多糖由上海丽金生物制品有限公司提供．RNA抽提所用试剂 由上海博星基因芯片有限责任 公司提供．Illumina小鼠全基因组表达谱芯片及杂交试剂盒由Iliumina．inc．提供． 1．2 实验方法 1．2．1 衰老模型小鼠的培养 取6--8月龄20g左右健康小鼠共25只，随机分为A(给药组，l0只)、B(对照组，l0只)和C(空白组， 5只)，A、B组中均五雄五雌，C组三雄二雌，饲养在25℃的室温，本实验采用灌 胃的方法喂食药物． A组(给药组)：以体重为