海岛棉gbdet2基因de克隆及表达分析【精选】.pdfVIP

分子植物育种，2015年，第 13卷，第 1期，第 119—124页 MolecularPlantBreeding，2015，Vo1．13，No．1，119-124 研究报告 ResearchReport 海岛棉GbDET2基因的克隆及表达分析 陈全家 。刘超 z倪志勇 冯文林 刘静静 陈章 良 康定明 曲延英 1中国农业大学农学与生物技术学院，北京，100193；2新疆农业大学农学院，新疆农业大学农业生物技术重点实验室，乌鲁木齐，830052 通讯作者．kdm@pku．edu．en；qyy@xjau．edu．ca 摘 要 类固醇 5oL-还原酶(DET2)，被认为是油菜素类固醇物质(BRs)生物合成的限速酶 。为了明确BRs在 棉花纤维发育中的作用，本研究利用RT—PCR方法从纤维组织中获得基因开放阅读框(ORF)全长，经测序验 证、Blast比对与同源性分析发现该序列编码的蛋 白质与其他植物的DET2蛋 白具有较高的相似性，故命名为 GbDET2基因。生物信息学分析结果表明，GbDET2基因ORF长 777bp，可编码 1个包含258个氨基酸的蛋 白。氨基酸多序列比对发现 GbDET2序列保守性较高，具有的DET2的典型特征。通过物种间系统发育树可以 看出GbDET2与GhDET2进化关系最接近，二者属于同一进化分支。实时荧光定量 PCR分