几种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的比较和应用.pdfVIP

中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会论文集 几种猪圆环病毒2型ELISA抗体检测试剂盒的比较与应用 张志慧，危艳武，吴洪丽，黄立平，李胜斌，刘建波，张 辉，王一平，刘 丹，刘长明+ (中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨150001) PCV2抗体效价的阳性血清50份和及阴性血清30份对这些试剂盒的敏感性、特异性及符合率进行比较。结果显 抗体检测表明，疫苗免疫21d后抗体阳性率达50％，免疫28d抗体阳性率达100％；对PCV2人工感染猪血清抗 体检测显示，病毒接种后第28d抗体阳性率为30．O％，第42d阳性率为100％；对临床送检猪血清抗体检测表 试剂盒可以作为检测PCV2疫苗免疫及临床感染猪血清抗体的有效方法。 关键词：猪圆环病毒2型；抗体检测试剂盒；比较和应用 circovirus 2， PCV2疫苗免疫评价及流行病学调查提供实验依据。 猪圆环病毒2型(Porcinetype PCV2)属于圆环病毒科圆环病毒属，为单股环状共 nt～1768ntlll。该 价闭合DNA病毒，基因组为1766 1 材料和方法 病毒被证实是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征 1．1 抗体检测试剂盒IPMA．PCV2抗体检测试剂 (PMWS)的主要病原之一，主要危害7周龄～15周 龄仔猪，临床表现为渐进性消瘦，淋巴肿大，被毛 盒为中国农业科学院哈尔滨兽医研究所产品(批号： 粗乱，皮肤苍白等12]。临床上PCV2通常与猪繁殖 与呼吸综合征病毒(PRRSV)混合感染，引起严重的号：PCV2012061 临床疾病【引。对该病控制的有效措施是通过疫苗预 防接种，并取得了良好效果【4l。随着PCV2疫苗的 Circo1．1 应用，需要评价疫苗接种的免疫效果。目前，用于 测试剂盒(D)，批号：201201；IngezimIgG PCVK．1ELISA 检测PCV2抗体方法主要包括免疫过氧化物酶单层 kit(E)，批号：10111。 1．2 细胞试验(IPMA)t5I、间接免疫荧光试验(IFA)‘6I间接 ELISAt7I、竞争ELISAl8I和阻断ELISAl91等。IPMA以景清楚的猪血清样品进行了PCV2抗体标定，每份 其敏感性高和特异性强而作为PCV2抗体检测的金血清重复3次，根据IPMA检测结果判定为标准阴、 标方法，但是多限于实验室使用。临床中主要采用 阳性血清。共获得30份标准阴性血清，50份标准 阳性血清，阳性血清中PCV2抗体效价为1：100的 PCV2-ELISA抗体检测试剂盒，但不同品牌试剂盒 的检测效果存在差异。因此，本研究以IPMA法作 为金标准对5种PCV2一ELISA抗体检测试剂盒的敏 感性、特异性及符合率进行了比较，旨在为临床中 这些标定的已知血清样品用于ELISA抗体检测试剂 一138一 中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中匡I免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会论文集 盒的评价。 精确度最好，试剂盒D次之。 1．3疫苗免疫、人工感染及临床未免疫猪血清样品 表1 5种试剂盒的敏感性、特异性及符合率比较 Tablel for and 的来源PCV2疫苗免疫猪血清10份、PCV2人工 Comparisonsens呐，specificity