健康人群CD4%2bCD25%2b调节性T淋巴细胞分布规律和年龄、性别的相关性研究.pdfVIP

第五届中国病毒性肝炎与艾滋病实验室诊断与临床高峰论坛 健康人群 CD4＋CD25＋调节性 T 淋巴细胞分布规 律与年龄、性别的相关性研究 江敏 朱爱兰 赵素萍 廖联明 基金项目：福建省卫生厅青年基金资助项目（2007-02-15 ） 作者单位：350003福建中医药大学附属第二人民医院检验科 近年来，Sakaguch[1]首次在小鼠 T 淋巴细胞 1．仪器与试剂：仪器为美国 BD 公司产的 中得到约 5%～10%的 CD4 ＋CD25＋T 辅助细胞， FACScalibur 型流式细胞仪，FITC-抗 CD4 mAb 、 即天然调节性 T 淋巴细胞（regulatory T cells ， PE-抗 CD mAb 和 PerCP-抗 CD mAb 试剂以及 25 3 Treg ），由于其具有免疫无反应和免疫抑制两大 TruCOUNT 绝对记数管及相应 CD /CD /CD T 4 8 3 特征，在肿瘤免疫、感染免疫、免疫病理、移植 三色试剂均购自美国 BD 公司。 物耐受、阻止自身免疫反应和维持机体免疫平衡 2 ．项目检测：抽空腹血2 ml ，肝素抗凝。 等方面日益受到关注，CD4 ＋CD25＋Treg 是目前研 每支上样管中加入 FITC-抗 CD4 mAb 、PE-抗 究最为深入的天然 Treg 。CD ＋CD ＋Treg 是调 CD mAb 和PerCP-抗CD mAb 和抗凝血进行染 4 25 25 3 节性 T 淋巴细胞亚群之一，是一群表型和功能 色分析。另设 FITC 、PE 同型对照。通过红细胞 特异的 T 淋巴细胞，它由胸腺产生后输出至外 裂解，洗涤后在流式细胞仪上采用 CellQuest 软 周，并通过主动调节的方式抑制存在于正常机体 件进行检测和分析。先以前向散射角（FSC ）及 内潜在的自身反应性T 淋巴细胞的活化与增殖， 侧向散射角（SSC ）确定淋巴细胞群，再以CD3 并识别自身抗原肽和分泌抑制性细胞因子[2] 。大 ＋CD4 ＋细胞为门，观测 CD3＋CD4 ＋细胞 CD25＋的 量的研究提示，CD4 ＋CD25＋Treg 细胞的数量减少 表达强度，并计算 CD3＋CD4 ＋CD25high Treg 细胞 或功能异常均可能导致自身免疫性疾病的发生 占的比率（% ），另外，将CD /CD /CD T 三色 4 8 3 [3]，但目前临床上尚未建立健康中国人群的 CD4 试 剂 和 相 应 的 血 液 加 人 到 绝 对 计 数 的 ＋CD25 ＋Treg 细胞的参考标准。本研究采用流式 TruCOUNT 管 中 ， 在 流 式 细 胞 仪 上 通 过 细胞术将对不同性别、不同年龄的健康人群的 MultiSET 软件自动分析，计算 CD3＋CD4 ＋T 淋巴 CD4 ＋CD25＋Treg 细胞进行测定，为临床患者提供 细胞的绝对值，并根据 CD3＋CD4＋CD25high Treg 参照。 细胞占的比率（% ），计算出 CD3＋CD4 ＋CD25high 细胞的绝对数，其代表了 CD4 ＋CD25＋Treg 细胞 对象与方法