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维普资讯 第27卷第5期 水 产 科 学 V01．27No．5 2008年 5月 FISHERIES SCIENCE Mav2Oo8 光合细菌 I的分离及其培养条件的优化 王慧玲，董 英，张红印 (江苏大学 食品与生物工程学院，江苏 镇江 212013) 摘 要：从虾塘淤泥中分离出1株能降解亚硝酸盐的光合细菌I，初步鉴定其为球形红假单胞菌。利 用Plaekett—Burman设计法，对影响光合细菌I生长量的 11个因素进行了筛选，确定影响该菌生长的 培养基的主要因索为NHC1、NaHCO，、温度和接种量；采用响应面法对其中的4个显著因子的最佳水 平进行研究，结果表明，当N王{4C1为0．99s／L、NaHCO，为 1．68g／L、温度 3O．18℃、接种量8．90％时，经 过5d培养 ，菌体密度显著提高，培养液OD 可以从0．972提高至 1．343。 关键词：光合细菌 ；分离；Plackett—Burman设计；响应面法 ；优化 中图分类号：Q935 文献标识码：A 文章编号：lOO3．1111(2008)05-0234-05 光合细菌 (Photosyntheticbacteria)是一类能进 1 材料与方法 行光合作用而不产氧的特殊生理类群的原核微生 物的总称，是最早出现的具有原始光合成体系的原 1．1 试验材料 核微生物，在 自然界的碳素、氮素、硫素转化循环中 1．1．1 待分离材料 起重要作用 。J。光合细菌营养丰富，细胞干物质 从高邮市郭集镇随机选择对虾养殖池，采虾池 中蛋白质含量超过60％，含有多种维生素，尤其是 底泥装于无菌玻璃瓶，用于光合细菌的分离培养。 B族维生素极为丰富，V 、叶酸、泛酸、生物素的含 1．1．2 培养基 量远高于酵母。此外，光合细菌还含有大量的类胡 以小林达治 红螺菌科富集培养基作为富集 萝 卜素、辅酶Q等生理活性物质，因此可作为鱼、虾 及初始基础培养基。NH4C11．00g、KH2PO40．20g、 的饵料添加剂 。 CH3COONa3．00g、NaHCO31．00g、酵母膏0．10g、 目前我国养殖业大多为静水养殖，高密度的养 NaC11．00g、MgC120．20g、T．M储液少量，蒸馏水 殖造成大量的鱼虾排泄物、残饵等有机物沉积水 1000ml，pH7．0(用 0．1mol／L的H3PO4调节)， 底，在养殖旺季，由于气温高，导致异养微生物大量 121oC高压灭菌20rain。 繁殖，有机物被分解 ，释放 出大量的氨氮 以及亚硝 固体分离培养基：采用 RCVBN扩大培养基，其 酸盐，从而影响鱼虾的生长 。 组成 为：CH3COONa3．0g、(NH4)2SO41．0g、 笔者从虾塘底泥中分离出1株光合细菌，前期 MgSO40．2g、NaC11．0g、KH2PO40．3g、K2HPO40．5 试验表明，该菌对养殖水体中的亚硝酸盐以及氨氮 g、CaC120．05g、酵母膏0．1g、微量元素 1．0ml、蒸 均有较好的降解作用，有望进行大规模生产应用到 馏水 1000ml¨…。 水质改 良中。鉴于培养基影响细胞代谢及发酵成 1．1．3 仪器 本，所以有必要对其进行优化。传统的单因素法仅 BUG—BOX厌氧工作站、分光光度计 wFJ一 能比较各因素已选定水平的优劣，无法提供未考