降糖通脉方对糖尿病大鼠内皮细胞功能的影响.pdfVIP

裹1各组动物BCL-2和P53表达率比较(N±S) P0．001 四、讨论 细胞对高血糖的反应是不同的，但最终都是导致细胞功能和结构的改变，有时甚至导致 细胞死亡。高血糖主要通过线粒体介导细胞凋亡。糖尿病时，呼吸链电子传递受损，产生活 性氧(ROS)增多，破坏线粒体跨膜压，增大线粒体膜通透性，，引起膜间腔内的凋亡因子(P53 等)释放到胞浆内，立即启动凋亡反应。BojungaJ等在糖尿病的体外研究中发现，在心脏 中高血糖介导了死亡受体和线粒体依赖性的凋亡。高血糖还可诱导细胞凋亡相关蛋白BCL一2 的激活。在糖尿病状态下，癌基因P53表达下降，抑癌基因等BAX、BCL一2表达上调，氧自 由基诱导基因的表达，可以刺激血管中层平滑肌的增殖，从而促进动脉粥样硬化的形成。此 外高血糖导致氧化和硝基化应激，产生超氧化物如氧自由基、N0活性产物，而这些物质在 在糖尿病并发症的细胞凋亡中起着重要的作用。 糖脉宁组方中的部分药物(生地黄、知母、麦冬、天花粉、玄参、山药、五味子)经 现代研究证实具有降糖作用。大量的实验研究已证实上述药物的主要降糖成分分别是：生地 黄(梓醇、地黄苷D、GABA)，知母(知母多糖、甾醇多糖)，麦冬(甾体皂苷、多糖)， 天花粉(天花粉凝集素、GABA)，玄参(玄参素、生物碱、甾醇)，山药(多糖、多巴胺、 精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸)，五味子(精氨酸，谷氨酸、天冬氨酸)。此外生地黄(豆甾 醇成分)、麦冬(罗斯考皂苷元、豆甾醇等成分)、五味子(樟烯成分)、山药(豆甾醇成 分)、金银花(肌醇、木犀草素、豆甾醇等成分)、甘草(刺芒柄花素、甘草酸、13一谷甾 醇等成分)也有降脂作用的报道。同时对单味中药有效成分的研究显示，方中生地黄(肉苁 蓉苷F、朝鲜连翅苷等成分)，知母(知母皂苷C、知母皂苷E等成分)，五味子(戈米辛J、 维生素Ea等成分)，金银花(氯原酸、丁香酚、异绿原等成分)等均具有抗氧化、清除氧自 由基的作用。糖脉宁增强BCL一2的表达，减少P53的表达，从而减轻糖尿病大鼠大血管内皮 细胞凋亡，与其降糖、降脂、抗氧化、清除氧自由基的作用密不可分。 降糖通脉方对糖尿病大鼠内皮细胞功能的髭饷 i 郑承红柯淑红 材料与方法 一、动物造模及分组治疗 糖高脂馁壮并尾静脉注射STZ(SIGMA)制备糖尿病模型。参照廖二元主编的《内分泌学》， 造模组大鼠的口服糖耐量中至少三个点血糖值达到正常值的2个标准差以上并维持一周，为 造模成功。最后成模动物30只。 2．主要药物：降糖通脉方由小檗碱(盐酸小檗碱，成都锦华药业有限责任公司，050432)、 JWlmj嗪(磷酸川芎嗪片，北京市燕京制药厂，050107)、女贞子提取物(武汉市湖北中医学 院药理研究窒提供)组成。 3．分组治疗：中药组：10只，灌服63mg／ml的悬浊液2ml；病理组：10只，灌服生理 盐水2ml；正常对照组：10只，灌服笠理盐水2ml。共三组，每日灌胃一次，疗程8周。治 作者单位：430022武汉武汉市第一医院 疗过程中，除正常组给予普通饮食外，余继续喂以高糖高脂饲料。 二、检测方法 1．血管性血友病因子(VWF)：ELISA法，试剂盒由上海太阳生物技术有限公司提供 内皮素(ET)：放射免疫分析法，试剂盒由北京北方生物技术研究所提供(051020)；一氧化 由北京中杉金桥生物技术有限公司提供(SC7269)。 ． 2．血管内皮生长因子(VEGF)免疫组织化学染色：以胞浆中棕黄色颗粒为阳性细胞。 定量分析采用HPIAS—1000高清晰度彩色病理图文分析系统，每张切片在高倍镜下(X400) PRO 随机选取10个视野并摄像保存，采用IMAGE PLUS软件设置阳性表达的宏程序，在同一 条件下，分析不同组别的VEGF含量，对阳性表达率进行组间比较。 三、统计学处理 实验数据以工土s表示，用SPSS统计软件(12．0)行单因素方差分析。 结果 各组间血清No、ET、Ⅵ『F及UAlb水平比较 糖尿病大鼠无明显的内皮细胞损伤但存在明显的血管通透性增大，并伴有微量蛋