静脉吸毒致HIV-1感染者合并HCV亚型分析的初步研究.pdfVIP

全自动方法检测限比手工法要好，达到50copies／ml。本研究在我国已有加样没备基础上开发全自动样本 汇集，在MPLC上进行全自动核酸提取，将核酸直接转至Cobas Amplicor分析仪的A一环中，从而消除了 人工转移样品过程中可能出现的人为误差，最后在COBAS AMPLICOR上扩增和检测，实现从样本准备、 核酸提取及扩增利检测一体化和自动化，符合大批量的NAT血液检测中心工作流程的需要j其HCV／ HIV—l RNA95％检出限量达到国际同等水平。完全满足血液混样检测需要超灵敏试剂的要求。 RNA的贮存和提取条件要求严格，主要是标本及实验环境中存在大量对RNA有强烈降解作用的 Rnase，因此在汇集、贮存、提取过程中凡接触样本的器具均应进行除Rnase处理外，手工提取法由于操 作步骤繁多更易导致RNA的降解。另外自动化核酸提取方法采用的是硅吸附法，能减少核酸手工提取 中易出现的操作失误，增强核酸提取的一致性和重复性，故灵敏度较传统手工法结果稍高。 MPLE是世界首批实现全自动核酸提取检测的设备，该系统能将靶物质核酸自动释放，由特异性寡 糖核苷酸探针捕获靶物，此探针通过生物素一链霉亲利素结合反应与磁珠附着，核酸就被白动纯化和浓 缩，从而完成核酸自动化提取。由于在全封闭的机内进行，能有效防止外来污染。MPLC能在1小时内 完成24份汇集池(约480人份)样本的核酸纯化工作，具有简单、快速，无污染，提纯效果好等优点， 比传统手工方法提前1．5小时，且手工操作时间仅15分钟左右，能满足血液核酸筛查自动化检测的需 求，具有广阔的应用前景。 4．静脉吸毒致HIV一1感染者合并HCV亚型分析的初步研究 浙江大学附属一院传染病研究所陈 亮姚航平 吴南屏 HCV感染在我国是除乙肝病毒外引起肝炎、肝硬化的重要病原体。HIV—l感染的蔓延是20世纪以 来全球关注的最严重的公共卫生问题。由于HCV和HIV—l有着共同的传播途径，因此它们的混合感染 问题也引起人们越来越多的重视。HCV混合HIV一1感染中HCV基因亚型的分布情况国外已有一些研 感染的自然史和分子流行病学调查，混合感染的临床监控和治疗都有着重要的意义。同时，以往的研究 多以PCR方法检测HCV亚型，操作过程相对比较烦琐。本实验采用abbott公司的MurexHCV l Semtyping 一6Assay抗体检测试剂盒，其结果与国内外报道一致，且具有快速简便的优点，值得在条件好的医疗 机构中推广应用。 材料和方法 一、标本和材料 (一)标本来源12份单纯HCV感染者的血清标本来自我院肝炎门诊病人(经卫生部检测合格的抗 blot 确诊)。另有79例HIV阳性血清标本来自德国鲁尔大学爱滋病研究中心，男性7l例，女性8例，年龄 21．60岁。血清冻于一80℃保存。 (二)试剂：abbott公司的MurexHCV l一6 Semtyping 盒。 HCV 二、实验方法：按照抗一HCV酶联检测试剂盒及abbott公司的Murexl一6 Serotyping Assay说明 书进行操作。 结 果 一91— 毒)传播，占90．90％；4例为性接触传播(包括异性和同性)，占9．10％。 讨 论 HCV和HW—l都可以经静脉注射、性接触、母婴垂直传播等途径感染。共同