Lentivirus(慢病毒)介导表达多基因的人胚基因工程神经干细胞实验研究.pdfVIP

本实验中明确地发现了完全性脊髓损伤后损伤平面以下的下运动神经元轴突所组成的PN发生退 变、崩溃、吸收、发芽增生及雪旺氏细胞增生和退变的现象，因此认为完全性脊髓损伤后存在损伤远端下 运动神经元的顺行性跨神经元变性。此研究结果对指导脊髓损伤的研究和治疗具有一定的现实意义。 从本课题实验结果来看，完全性脊髓损伤后损伤平面以下的下运动神经元于伤后7天即发生变化， 并且其结构的退变呈进行性发展，因此本课题认为在治疗时机的选择上不应仅从SCI局部的病理变化上 考虑，而且还应全面考虑损伤远端的病理变化特点。鉴于远端结构较早发生退变，SCI后的各种干预和 治疗措施应在远端结构发生明显的退变之前尽早进行，以最大限度地避免或减少远端结构的退变，提高 疗效。 Lentivirus(慢病毒)介导表达多基因的人胚基因工程 神经干细胞实验研究 汤逊1 林月秋1 M．OUDEGA2B．BLITS3 蔡培强1 阳运康1徐林4周田华1 TheMiami toCure 1成都军区昆明总医院骨科四川成都2 Project ParalysisUniversity ofMiamiSchoolofMedicineMiamiFL33 3 for GraduateSchool 第七届全国脊柱脊髓损伤学术会议 101，USA InstituteforBrainResearch Netherlands Amsterdam，Netherlands Amsterdam，The4中国科 学院昆明动物研究所云南昆明 【摘要】 Neural 经干细胞(HumanStem Cell，hNSC)的可行性，以便为脊髓损伤研究提供材料。方法①培养和 eluolt$cenGe 鉴定hNSC；②用携带绿色荧光蛋白(Green Root 荧光显微镜观察、鼠胚背根神经节培养(DorsalGanglion，DRG)和Slotblot等方法检测基因工程 hNSC的多基因表达。结果 ③基因工程hNSC的培养液能促使DRG旺盛生长；④SlotBlot检测到基因工程hNSC能高效分泌NT一3 蛋白。结论成功构建了同时携带并稳定表达多基因的基因工程hNSC，为脊髓损伤基础研究及进一步 临床应用提供有价值的细胞资源，具有广阔应用前景。 Cord 脊髓损伤(Spinal Injury，SCI)后的再生修复一直是医学科学领域内的一大难题。一方面脊髓 的原发性损伤及其继发的病理生理改变导致脊髓内功能细胞缺失；另一方面神经营养因子或诱导因子不 足，致使绝大部分轴突的再生努力归于失败，即所谓“夭折性再生”。因而如何改变SCI后不适宜再生的 微环境是研究和治疗SCI急需解决的问题。NSC是CNS中具有自我更新能力和多向分化潜能的细胞， 能被大量扩增，并可在体内和体外诱导分化成CNS内3种主要的功能细胞：神经元、星形胶质细胞、少突 胶质细胞，是SCI后再生修复的理想材料和基因载体。因此，采用神经营养因子基因修饰NSC移植可能 是最具前景的治疗方法之一。本文作者应用无血清培养技术联合应用有丝分裂抑制剂bFGF和EGF从 泌NT一3的基因工程hNSC，并经荧光显微镜观察、鼠胚背根神经节培养及SlotBlot等方法分别从形态