调控气道神经可塑性的细胞内关键信号转录因子的初步筛选.pdfVIP

分组交流 中华医学会第六次全国哮喘学术会议暨中国哮喘联盟第二次大会论文汇编 疫功能紊乱的全身性变态反应性疾病，Thl／Th2细胞失衡既是哮喘气道炎症的重要特征，也是哮 的相互拮抗及其平衡失调引起的免疫病理改变在哮喘的发病中起重要的作用。针对哮喘发病过程 中Th亚群失衡的现象，调整Th亚群的平衡已经成为开发哮喘治疗药物的重要方向【“以4J。传统的 糖皮质激素已被证实可以部分纠正哮喘患者的TH亚群失衡现象，改善哮喘的气道炎症，中药雷公 藤也具有类似的作用【l51。实验结果表明，哮喘模型组大鼠与正常对照组相比，气道炎症明显加重， 血清、支气管肺泡灌洗液中几-4含量明显升高，而IFN．y含量明显降低，以上结果证实了哮喘 Th亚群失衡学说，哮喘大鼠存在IFN．Y／儿4失衡，即Thl／Th2细胞失衡，为Th2型反应模式。 从实验结果来看，干预组大鼠同哮喘组相比，气道炎症明显减轻，血清和支气管肺泡灌洗液中IFN —Y明显升高，几一4浓度明显降低。说明胡黄连苷Ⅱ有效地纠正了失衡的哮喘大鼠全身和气道 局部TH亚群，从而抑制了哮喘的全身和气道局部炎症反应。 实验结果还显示，胡黄连苷II干预组可以明显延长诱喘潜伏期，减轻哮喘症状，对整体动 物引喘有保护作用。 根据以上实验结果，我们可以推测胡黄连苷II通过某些途径，减少炎性介质释放，抑制炎 性介质对炎性细胞的趋化活性，减轻气道炎症，抑制支气管收缩，提高肺动态顺应性，改善局部 及全身Th亚群失衡，从而发挥抗炎平喘的作用，其机理有待进一步研究。胡黄连苷Ⅱ可能会成 为未来较有前途的防治哮喘的药物。 调控气道神经可塑性的细胞内关键信号转录因子的初步筛选 中南大学湘雅医院呼吸科(410008) 王慧 潘频华覃庆武赵然然胡成平 【摘要】目的：在研究RSV感染后气道神经源性炎症和气道神经可塑性致气道高反应性的基础上， 研究呼吸道合胞病毒(RSV)感染后大鼠脊髓背根神经节神经元转录因子的表达变化，筛选可能与 气道神经可塑性相关的转录因子，为哮喘的防治探索一条新的途径．方法：1-2周龄SD大鼠随机区 腹腔注射麻醉大鼠，每一个鼻孔内滴入0．4ul／g无病毒培养基。②RSV感染组(30只)，用2％戊巴比 毒悬液。以上操作每周重复一次。各组第8周将其中5只大鼠进行气道反应性测定，气道反应性测 定后，取左肺，HE染色观察病理改变，行免疫组化染色检测，在冰面上迅速剖取脊髓背根神经节 C7一T5于冻存管中，保存于液氮中。免疫组化检测气道、神经节SYN、NF的表达，用转录因子活性芯 片初步筛选调控气道神经可塑性的信号转录子，westernblot检测EGR一1在肺组织和脊髓背根节 的表达变化。结果： (1)实验组大鼠吸入梯度浓度组胺后气道阻力明显高于正常对照组，差异有 下调2倍以上。(3)western 在RSV感染组表达明显低于对照。结论：转录因子活性芯片初步筛选出了反复呼吸道合胞病毒感染 后脊髓背根节神经元细胞内发生活性改变的转录因子98种，即刻早期反应基因-I(EGR-1)可能不 是是其中最关键的转录因子，为进一步探索反复呼吸道合胞病毒感染后气道神经可塑性变化的关 键转录因子提供了研究基础。 大量的研究表明婴幼儿早期的严重感染是以后哮喘发展的危险因素．近年来提出RSV感染 后存在“神经源性炎症”，即气道黏膜下的神经末梢(曲张体)释放神经肽类递质，引起平滑肌收 ．130． 主坐匿堂金筮盍达全垦璧监堂盔金这壁主国堡噎璧望箜三逸盔金迨塞、汇缠 ． 金堑塞速 缩、微血管漏出、黏液分泌和气道高反应性n’。神经营养因子可以改变感觉和运动神经元的功能 活动，可以提高和改变神经肽和速激肽的产生．这些效应被称为神经可塑性，这些是神经源性炎症 发展的结果‘2’．已被证实神经机制在呼吸道合胞病毒感染及以后的气道高反应性中起重要的作用． RSV感染后引起气道神经网络的结构和功能改变(即神经可塑性Neural Plasticity)可能是RSV 感染长时间后发生气道高反应性和哮喘的关键㈣。我们以前的研究发现“’大鼠气道突触囊泡素和 神经丝的表达显著增高，并且与气道RSV感染后引起的气道神经性呈正相关关系，突触囊泡素和 神经丝是感觉神经元重要结构蛋白，其表达增高提示气道神经末梢发生某些可塑性改