人唾液CCL28与分泌型IgA的相关性研究.pdfVIP

2007年度全国第十二届口腔医学学术研讨会论文汇编 ·39· ·大会交流· 人唾液CCL28与分泌型IgA的相关性研究 姜广水胡以俊李潇 李冬 山东大学口腔医学院 山东济南(250012) 唾液中的分泌型IgA(sIgA)能够阻止病原微生物在口腔中的粘附定植；因其本身的结构特 点，slgA对环境中的蛋白酶的分解破坏具有较强的抵抗能力，在保护口腔健康方面发挥着重要作 用。粘膜相关上皮趋化因子(mucosae—associated epithelia slgA的关系、以及与口腔健康状况的确切关系，迄今尚不明确。本研究通过探讨人唾液腺中CCL28 与slgA抗体分泌的相关性，旨在为口腔粘膜免疫机制的深入研究提供实验依据。 l资料与方法 1．1 研究对象选取山东大学在校大学生及研究生共42例，其中女22例，男20例，年龄 18～30岁。经检查，受试者均无口腔炎症表现。 1．2标本采集采用滴取法收集受试者非刺激性全唾液。唾液收集在早晨、空腹、安静房间 里进行。嘱咐受试者用清水30ml漱口以清除口腔内残渣，吐尽残留液体，5min后使唾液自然流 出。收集其非刺激性全唾液2ml于无菌平板培养皿中，而后迅速分装至无菌EP管中，立即置．20℃ 保存待用。 液、显色液、终止液等，均为RD Inc．产品。Dade human System Behring IgA检测试剂盒，为 680 Inc．产品。酶标仪(Model DadeBehring Microplate 全自动免疫化学分析仪(Beckmancoulter coulter公 immageimmunochemistrysystem)为Beckman 司产品。 ‘ 1．4唾液中CCL28的检测采用夹心ELISA方法定量检测唾液中CCL28。操作过程严格按 试剂盒要求进行。主要步骤如下：用试剂盒提供的稀释液按l：100稀释唾液标本，而后将稀释后 h，冲洗板孔以除去未结合的抗原；加入 的唾液标本加入96孔平底板(100I_tlP孔)，室温孵育l h，冲洗板孔；再加入底物四甲 辣根过氧化物酶标记的抗CCL28多抗(200p,lP孔)，室温孵育3 基联苯胺(200I，tlP孔)，避光显色30min；最后加入H2 nm处测吸光度(A)值。商品化可溶性人CCL28蛋白倍比稀释后作为标准品，绘制标准曲线。 1．5唾液中slgA的检测应用美国Beckman公司全自动免疫化学分析仪和标准化试剂盒， 速率散射比浊法定量检测唾液中slgA，操作方法参照按仪器资料进行。 1．6统计学处理采用SPSSI 1．0软件进行统计学分析。人唾液中CCL28与slgA含量以平 均数4-标准误表示，并对二者行Pearson相关性分析。 2 结 果 2．1 。40‘ · 2007年度全国第十二届口腔医学学术研讨会论文汇编 在正常范围内。 2．2唾液中CCL28含量与slgA抗体分泌的相关性 唾液中CCL28含量与slgA抗体分泌 系数具有显著的统计意义(P0．001)。 口 皂 暑 S 8 O 50 100 150 200 250 ．IgA(mg％)