鬼臼毒素分子印迹电化学传感器的研制及应用.pdfVIP

第 42卷 分析化学 (FENXIHUAXUE) 研究报告 第6期 2014年 6月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 842～846 DOI·10．3724／SP．J．1096．2014．40017 鬼 臼毒素分子印迹电化学传感器的研制及应用 王春琼 白慧萍 陈瑾 曹秋娥 (云南大学化学科学与工程学院／教育部 自然资源药物化学重点实验室，昆明650091) 摘 要 以鬼臼毒素 (Podophyllotoxin，P )为模板，甲基丙烯酸(Methacrylicacid，MAA)为功能单体 ，乙二醇 二甲基丙烯酸酯 (Ethyleneglycoldimethacrylate，EGDMA)为交联剂，固定 P ，MAA和EGDMA的摩尔比为 1：2：100，采用原位聚合法，以甲醇一乙酸(1：1，V／V)为洗脱剂 ，制得鬼臼毒素分子印迹电化学传感器 (PPr molecularlyimprintedelectrochemicalsensor，P 一MIECS)，并用循环伏安及交流阻抗法表征了其性能。在优化 条件下，此传感器检测P 的线性范围为1．0—120~mol／L，检出限为0．47~tmol／L，将其用于桃儿七和人血清 样品中P 的检测 ，相对标准偏差小于4．O％，加标回收率在95．O％一103．3％之间。 关键词 鬼臼毒素 ；分子印迹膜；电化学传感器；原位聚合法 1 引 言 鬼臼毒素(P )是分布于小蘖科鬼臼属植物(如桃儿七、八角莲等)中的木脂素类抗肿瘤成分，可用 于治疗睾丸癌、淋巴癌、白血病等 J，在中药材及血清中的含量检测领域备受关注。现有检测 PPT的方 法，如液相色谱法 J、毛细管电泳法 和紫外光谱法 等，存在耗时、灵敏度不佳等不足，所以研究高 效、快速、简单的PVF检测方法仍有必要。分子印迹电化学传感器 (MIECS)是以分子印迹材料作为传 感介质的一类电化学传感器 ，不仅具有对 目标物的特异性识别作用，而且响应灵敏、快速 ，选择性好，在 复杂体系的痕量分析中显示出较好的应用前景_5 。目前，MIECS的制备有涂附法、原位聚合法、电聚 合法、溶胶．凝胶法等 ¨，其中原位聚合法因制备简单和传感器响应性能理想而被广泛采用 ¨引。本研究 以鬼臼毒素为模板，采用原位聚合法制备了P 分子印迹 电化学传感器(PPT．MIECS)。此传感器具有 洗脱容易、响应时间短、重现性好、使用寿命长等优点，可用于中药材及血清中鬼臼毒素的测定。 2 实验部分 2．1 仪器与试剂 CHI660电化学工作站(上海辰华仪器公司)，采用三 电极系统：裸玻碳 电极、印迹或非印迹膜修饰 玻碳 电极为工作电极 ( =3mm)，铂电极为辅助电极，饱和甘汞电极为参比电极；UV一2401紫外．可见分 光光度计(Et本岛津公司)。 鬼臼毒素 (Podophyllotoxin，PPT)、去甲表鬼臼毒素、山奈酚和槲皮素标准品(中国药品生物制品检 定所)；牛血清白蛋白、胆红素和葡萄糖 (美国Acrosorganics公司)。上述试剂的储备溶液(1．0mmol／L) 除牛血清 白蛋白用水配制外，其余均用乙醇配制。 ．甲基丙烯酸(Methacrylicacid，MAA，苏州安利化工 厂)；丙烯酰胺 (Acrylamide，AM，国药集团化学试剂公司)；4-乙烯基吡啶 (4-vinylpridine，4-VP，美国 Acrosorganics公司)，上述试剂均直接使用；二甲基丙烯酸乙二醇酯 (Ethyleneglycoldimethacrylate，EGD- MA，上海珊瑚化工厂)，使用前减压蒸馏纯化；偶氮二异丁睛(Azobisisobutyronitrile，AIBN，上海试剂四 厂)，使用前用乙醇重结晶纯化。实验所用试剂除特殊说明，均为分析纯；水为 18．25MI}cln去离子水。 2．2 实验方法 2．2．1 PPT印迹传感器的制备 依次将 0．5mmo|PP1’，1．0mmo|MAA和 50mmo[EGDMA溶于 0．5mL乙腈中，超声振荡5min后静置 1h，使MAA与P 充分作用；加入 30mgAIBN，超声溶解后通 2014-01-07收稿；201