金黄地鼠Dpl基因克隆及其组织特异性表达的研究.pdfVIP

中国兽医杂志 2008年 (第 44卷)第 11期 3 金黄地鼠Dpl基因克隆及其组织 特异性表达的研究 李玉荣 ，周向梅 ，尹晓敏 ，杨建民 ，赵德明 (1．中国农业大学动物医学院 国家动物传染性海绵状脑病实验室，北京 海淀 100193； 2．河北农业大学动物科技学 院，河北 保定 071001) 摘要 ：本文成功克隆了金黄地 鼠Dpl(PrP—likeproteindoppel，Doppe1)基因，并采用实时荧光定量 PCR法对其组织特异性 表达进行 了研究。根据 已发表家鼠Dpl基因序列设计 引物 ，采用 PCR直接扩增金黄地鼠(Hamster)的Dpl基因CDs区，序列 测定和分析表明金黄地 鼠的Dpl基因CDs区全长 537bp，编码 178个氨基酸的前体蛋 白，不存在基因多态性 。经基 因序列对 比分析 ，金黄地鼠与其他 1O种属哺乳动物 Dpl基因有较高 同源性，均为 7O．8 以上 ，且与 鼠科Dpl序列的同源性最高 (86 )。 实时定量 PCR结果表 明，在所检测组织中，DplmRNA在睾丸表达量最高，其次为脾脏 、心脏 、骨髓和脑 ，其在肝脏、肺脏、肾脏 和肌 肉中的表达低于检测水平 ；成年动物与未成年动物相 比，在睾丸组织的表达量 ，成年 鼠显著高于未成年鼠；在成年 鼠脑组 织检测不到 DplmRNA 的表达 。本研究对金黄地 鼠Dpl基因序列进行分析测定，并对其在不同组织的生理表达进行 了定量 ， 以期为其功能的进一步研究提供基础数据 。 关键词 ：金黄地 鼠；Dpl；克隆；实时荧光定量 PCR；mRNA表达 中图分类号：Q78 文献标识码：A 文章编号：0529—6005(2008)11-0003—03 Dplgenesequenceandreal—timepolymerasechainreaction analysisofgeneexpression inGoldenhamster LIYu—rong～，ZH0U Xiang-mei，YIN Xiao—rain ，YANG Jian-min ，ZHAO De—ming ， (1．NationalAnimalTransmissibleSpongiform EncephalopathiesLaboratory，CollegeofVeterinaryMedicine， ChinaAgriculturalUniversity，Beijing100193，China； ， 2．DepartmentofAnimalScienceandTechnology，HebeiAgriculturalUniversity，Baoding071001，China) Abstract：Inthepresentstudy，DplcDNA hasbeenclonedfrom hamster，apopularanimalmode1． ThecompletesequenceofDplconsistof537nucleotidesencoding178aminoacids．Nonucleotidepolymor— phism intheopenreadingframeofthehamstergenewasfound．SequenceanalysisbyDNAMAN software showedthathamsterDplhasthehighesthomologywithhousemouseDpl(86 )．Thequantificationresult showedinhamsterthat5tissuesofDp1mRNA couldbedetected，withtestisthehighestlevels，followed byspleen，heart，bonemarrow an