酶联免疫检测技术在猪肉安全检测中的应用.pdfVIP

维普资讯 第 28卷 第 1期 农 业 与 技 术 V01．28 No．1 · 15 · 2008年 2月 A cultureTechnology Feb．20o8 酶联免疫检测技术在猪 肉安全检测中的应用 贺显书 {黑龙江省农垦科学院测试化验中心 ，黑龙江 佳木斯 154007) 【摘 要】酶联免疫吸附法 (Enne—linkedin．nunsorbentassay，FJJSA)是指回相吸附技术和免疫酶技术相结合的一种方法，是 一 项先进 的免疫化学测定技术。因其具有特异性高、敏感性强、结果易于检测等特点．常用于对猪 肉中某些违禁药品、添加刑及 有害微生物的筛栓和毒素的检测，是猪肉安全检测中的一项新技术。 【关键词】酶联免疫吸附法 (EIJSA)；猪肉；安全；检测 中图分类号：$40 文献标识码：A 酶 联 免 疫 吸 附 法 (Enzyme— linked 的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其 immunsorbentassay，简称 ELISA)是一种固相酶免 他物质分开，最后结合在 固相载体上的酶量与标 疫分析方法 。它始于 1971年 Engrail用碱性磷酸酯 本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的 酶标记的免疫球蛋 白测定 IgG，随后这种方法得 底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量 到迅速发展和不断完善。由于 ELISA结合了免疫 与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色 荧光法和放射免疫法两种技术的优点，具有选择 反应的深浅程度定性或定量分析。由于酶的催化 性好、灵敏度高、结果判断客观准确、检测速度 频率很高，故可极大地放大反应效果，从而使测 快、实用性强等特点，因而弥补了经典化学法和 定方法达到很高的灵敏度。 其他仪器法的不足，目前已广泛应用于临床医学 和生物学等领域，在猪 肉中应用研究和应用也变 2 ELISA的方法 得越来越多。 酶免疫测定法可分为非均相免疫测定法和均 1 ELISA的基本原理 相免疫测定法。均相酶联免疫法是将抗原附着于 固相载体上，其中直接法是用酶标记的抗原测抗 ELISA是把抗原抗体免疫反应的特异性和酶 体。间接法是将利用特殊的标记的前抗体和二抗 的高效催化作用有机地结合起来的一种检测技术， 抗体进行检测，非均相酶联免疫也可分为夹心法 它既可测抗原，也可测抗体。首先使抗原或抗体 和捕获法。是利用两个分开的抗体作为反应物。 结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 其一是附着于固相载体用来捕获抗原，第二个抗 然后使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗 体是用于检测，酶联免疫可用于检测抗原，或用 体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又 抗原分析抗体。常用的测定方法有三类 ：间接法 保留酶的活性。在测定时，把受检标本 (测定其 测抗体，双抗体夹心法测抗原 ，竞争法测抗原。 中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步 前两种方法主要用于测定抗体和大分子抗原．适 骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤 用于临床诊断上．而竞争法是测定小分子抗原的 维普资讯 农 业 与 技 术 2O08年2月 ·16· 方法 ．因而尤其适用于食品安全检测。 3．2 用于黄曲霉毒素 Bl的