多肉植物宝草体细胞胚发生的亚显微结构研究(第二部分).docVIP

多肉植物宝草体细胞胚发生的亚显微结构研究（第二部分） 2.2早期培养愈伤组织 主要由薄壁细胞组成，细胞排列较紧密无细胞间隙，胞间连丝开始出现；细胞内细胞质浓密，细胞核体积增大，较多位于细胞中央，核膜不规则，核仁致密；线粒体数量明显增加；细胞内有中央大液泡并占据细胞大部体积；叶绿体的基粒和基质片层消失，叶绿体转变为原质体，体积变小，内含有小淀粉粒（图3，4）。 2.3早期胚性细胞 细胞核大基本居中；中央大液泡基本消失，有多个大小不等的液泡分散分布于细胞质中；细胞质电子密度加强；高尔基体、粗面内质网、线粒体、核糖体开始增多；细胞壁上出现许多外排小泡或吞噬泡；细胞内仍然有为数不多的质体（图5，6）。 2.5球形胚 细胞核大居中，线粒体数量明显增多；线粒体、核糖体、粗面内质网、高尔基体等细胞器丰富，有少量质体，细胞壁增厚，细胞均等分裂，胞间连丝较为丰富，中央大液泡消失（图7，8）。 2.6鱼雷胚 细胞核极大，近一端。细胞壁厚，胚细胞均等分化，细胞质多贴于细胞壁上，有小液泡形成，线粒体、高尔基体、粗面内质网等细胞器仍较丰富，质体明显增多，且有基质类囊体、嗜锇颗粒出现（图9，10）。 2.7心形胚 细胞核大，居中，有较多的小液泡，无中央大液泡，细胞质电子密度加强，细胞器丰富，细胞壁继续加厚，也可看到胚细胞均等分化，细胞内部质体开始明显增多，质体体积明显增大，基粒和基质片层开始出现；核糖体遍布于细胞质的基质中。有的附着于内质网上；高尔基体、内质网、核糖体等，特别是线粒体数量多且呈活跃状态（图11，12）。 2.8子叶胚 细胞具中央大液泡，细胞核贴近细胞壁，内质网、高尔基体、线粒体相应减少，而见有叶绿体分裂，叶绿体开始大量形成，并且贴于细胞壁上（图13，14）。 图9 鱼雷形胚细胞（Bar=5μm）；图10 鱼雷形胚细胞（Bar=0.2μm）；图11 心形胚细胞（Bar=2μm）；图12 心形胚细胞（Bar=0.2μm）；图13，14 子叶形胚细胞（Bar=0.2μm）； Fig9 Torpedo-shaped embryoids （Bar=5μm）；Fig10 Torpedo-shaped embryoids（Bar=0.2μm）；Fig11 Cordatus embryoids（Bar=2μm）；Fig12 Cordatus embryoids（Bar=0.2μm）；Fig13,14 Cotyledonary embryoids（Bar=0.2μm） Ch：叶绿体，ER：内质网，G：高尔基体，M：线粒体，N：细胞核 Nu：核仁，P：质体, PL：胞间连丝，S：淀粉粒，V：液泡，W：细胞壁 Ch: chloroplast, ER: endoplasmic reticulum, G: golgi body , M: mitochondrion, N: cell nucleus Nu: nucleolus, P: plstid, PL: plasmodesma, S: starch, V: vacuole, W: cell wall 3讨论 通过观察，细胞从培养前到体细胞胚发生，至成熟体细胞胚形成，细胞壁、细胞质、细胞核及细胞内各种细胞器等结构发生了一系列的变化，这些变化呈现一定的规律性，比较其他人的研究[ 3，4，5]，发现这些变化是适应体细胞胚形成的结果。 细胞壁、细胞间隙及胞间连丝的变化：培养前细胞壁薄、细胞间隙大；在早期胚性细胞、球形胚、鱼雷胚及心形胚阶段细胞壁增厚，细胞间隙几乎消失；至子叶胚阶段细胞间隙重新出现，但细胞壁达到最厚。有人认为胚性细胞的细胞壁加厚是进一步分裂和发育形成体细胞胚的前提[6]。Chapman Audrey 等在研究菊苣体细胞胚早期发育过程中细胞壁的增厚变化[7]。最初形成的胚性细胞与周围细胞间还存在广泛的胞间连丝。众所周知，胞间连丝在植物细胞分化发育、物质运输和对刺激或信号的传导中起着重要的作用。由此推测早期的胚性细胞通过胞间连丝传递物质和信号为胚性细胞的进一步分化与发育奠定了基础。 细胞质的变化：培养前细胞质贴壁、电子密度小，培养后细胞质在细胞中央分布逐渐增多，电子密度加大，在球形胚、鱼雷胚、心形胚阶段电子密度最大，也表明细胞此时最为活跃。子叶胚阶段细胞质又又开始贴壁分布，电子密度又明显减少。 细胞核的变化：培养前细胞核较小，细胞进入胚性状态细胞核增大，在早期胚性细胞、球形胚、鱼雷胚及心形胚阶段都可看到细胞内具较大的细胞核，细胞核居中，子叶胚阶段后细胞核相对较小，并逐渐靠细胞壁分布。 液泡的变化：宝草属于叶多肉植物，培养前叶肉细胞液泡极大，诱导产生的愈伤组织细胞中液泡变小，在早期胚性细胞中中央大液泡基本消失，球形胚、鱼雷胚无中央大液泡，心形胚阶段有较多的小液泡，子叶胚阶段后中央大液泡