B7-1基因修饰的肿瘤细胞疫苗抗肿瘤的实验的研究.pdfVIP

of 10th Collect／onofSelected InmmnologyAnnivemmy(1993—2∞03)APapem He“∞西i∞gPmvlm*Society 2mol／L尿素，只溶于8mol／L尿素。因此，在提取蛋我组装成、仙，我们分析复性后除融合蛋白外， 白时我们采取目的蛋白，处理时为避免破坏目的蛋 55KD处的蛋白可能为L1自我组装的VLP。此推测 白结构，加入还原剂DTrO在蛋白复性过程中，为保有待进一步证实。 证目的蛋白正确折叠，采用分级透析的方法除去变 研究表明，通过提取包涵体、变性溶解、复性、亲 性剂和还原剂，以使其复性并缓慢折叠。复性后的 和层析的过程，可以获得高纯度的HPVl6LI融合蛋 蛋白以亲和层析方法纯化，获得了纯化的蛋白，并经 白，为进一步研究其免疫学活性以及其在预防和诊 Western blot所证实。这为进一步研究HPVl6LI的生断中盼应用打下了工作基础，我们正在进行提取后 物学特性奠定基础。 的融合蛋白对Balb／c小鼠的免疫原性实验研究。 在复性的过程中，许多条件均影响FIPVl6LI融 [参考文献】 合蛋白的重折叠oJ。首先。细菌的DNA和蛋白成分 影响复性时蛋白的折叠．在处理时加入DNA酶I以[1】Bo·dI 消化DNA，并以反复洗涤的方法除去细菌成分。另 87：?96-902． [2]BradsBL．MunoEN．[J】J妇Ivlld．1987，醴：3091． 外，不溶性包涵体的形成是由于大量外源蛋白表达 D】谷鸿喜．钟照华，凌虹，等．[J】．中华微生物与免疫学杂志。 聚集的结果，融合蛋白的浓度也影响折叠的效果，因 1998．IS(2)：95． 此重折叠时应控制蛋白的浓度，实验中我们调整融 14]崔立斌．马清钩．[j]生物工程进展，1998．tg(t)：36加． Is】wa如嵋，hl玎c，J吐kF．dd．【盯，vIIdo留．1998．243：423． 合蛋白浓度为0，1t耐nd进行复性、折叠。同时，应 严格控制pH值和盐浓度。 431． 基金项目：黑龙江省科委霞大攻关i景题(O％．cm03) 在进行亲和层析时发现，复性蛋白与亲和柱结 刊登杂志：哈尔癀医科大学学报。2001，35(4)：235 合后的滤出液中含有55KD的蛋白带，曾有文南报 道，HPVl6LI蛋自在体外复性折叠的过程中可以自 B7．1基因修饰的肿瘤细胞疫苗抗肿瘤的实验研究 张涛媛‘，李殿傻1，王志华1．张春艳‘，曹雪涛2。叶胜走? (I．哈尔滨医科大学肿瘤研究所，哈尔滨150040；2．第二军医大学免疫学教研室，上海200043； ‘ 3．上海医大肿瘤研究所，上海200011) 【摘要】目的研究BT-I基因修饰的肿瘤细胞作为宿苗的抗肿瘤作用。方法通过逆转录病毒载体，将小鼠 B7．1瘤苗作用减弱。结论B7-1基因修饰的肿瘤疫苗可诱导体内的抗肿瘤免疫反应，导致肿瘤的都分根除．为基 因修饰的肿瘤疫苗的I临床应用提供了实验依据。 【关键词】137．1；肿瘤疫茁；基因治疗 modifiedEL-4cellsvaccine T