除盐技术在基于质谱的蛋白质组学研究应用.pdfVIP

全国生物医药色谱学术交流会(2010)论文集 B33除盐技术在基于质谱的蛋白质组学研究中的应用 周志贵1廖杰2廖～平1白玉1刘虎威1幸 2中国人民解放军总医院，北京100853 1北京大学化学与分子工程学院，北京，100871； 关键词：除盐，质谱，蛋白质组学 生物质谱是蛋白质组学研究中的重要技术手段，然而蛋白样品处理过程中常用的一些非挥 发性盐会抑制样品的离子化，造成检测灵敏度的降低甚至无法检测，因此，对蛋白或多肽样品 进行除盐往往是质谱分析前必不可少的步骤。 目前，蛋白质和多肽样品的除盐方法主要是基于固相萃取技术，最口蛋白或多肽保留在吸附 材料上，盐类不吸附而被除去，然后将保留的蛋白或多肽洗脱下来进行检测或者直接检测。常 用的吸附材料有C4、C18等反相固定相、高分子聚合物t1‘31、石墨化碳卜61、纳米材料(如 白质或多肽的离线除盐与富集(如ZipTip)，或者与液相色谱等分离手段在线联用，实现样品 的在线除盐与分离分析；也可以将吸附材料修饰在基质辅助激光解析(MALDI)质谱的样品 靶上实现靶上除盐(on-target (SDB)膜【1 o】等膜材料作为吸附材料具有比表面积大等优点，在蛋白质的富集除盐中得到应 用。 除了固相萃取技术，渗析技术【11．131也被用于蛋白多肽样品的除盐，尤其是在线的微渗析装 置提供了一种快速有效的除盐方法。例如Canarelli等人【ll】将纤维素中空纤维微渗析器连接在 亲和色谱或离子交换色谱与质谱之间，在色谱中得到分离的蛋白质经过在线除盐后进入质谱进 在线联用实现蛋白的快速除盐与鉴别。 此外，还有一些其他除盐技术，例如Wilson等人f14】利用微流控芯片的层流现象，即蛋白 液流与缓冲液流在微通道中形成两层，由于盐与蛋白扩散系数相差较大，蛋白液流中的盐类快 速扩散到缓冲液中被除去，而蛋白损失较少；本课题组周宇等人【”1开发了一种利用电场，膜 技术和流体控制技术的协同作用的微型电纯化装置(MEPD)，通过类似电渗析的原理可实现蛋 白样品的快速除盐，与ESI-MS联用检测蛋白的灵敏度大大提高，在毛细管电泳．质谱联用在 线除盐方面也有着很好的应用前景。 参考文献(略) 国家自然科学基金(No20975005)资助项目 ‘通讯联系人：Email：hwliu@pku。edtLen 67