毛白杨抗病相关转录因子基因PtWRKY1的表达特性分析.pdfVIP

基因组学与应用生物学，2014年，第 33卷，第 4期，第 853859页 GenomicsandAppliedBiology，2014，Vo1．33，No．4，853—859 研究报告 ResearchReport 毛 白杨抗病相关转录因子基因PtWRKY1的表达特性分析 项争 蔡兼 谌殷蕾 钮俊 刘雪萍 胡惠雯 侯欣瑜 林善枝 北京林业大学生物科学与技术学院，林木育种国家工程实验室，林木花卉遗传育种教育部重点实验室，北京，100083 同等贡献第一作者 通讯作者，linsz2002@163．com 摘 要 WRKY转录因子作为植物特有的一类重要转录调控因子，广泛参与植物对生物和非生物胁迫的应 答反应及形态发育和组织衰老等，已引起人们的关注 。本文以前期克隆得到的毛白杨WRKY转录因子基因 (命名为PtWRKY1)为研究对象，开展其基因枪介导洋葱表皮细胞瞬时表达、外源信号分子(水杨酸 SA，茉莉 酸MeJA，脱落酸ABA)诱导表达、转PtWRKYI基因烟草植株的烟草花叶病毒(TMV)接种实验以及抗病相关 基因表达的实时荧光定量 RT．PCR(qRT—PCR)分析等研究。结果表 明，PtWRKY1基因编码蛋 白定位于细胞 核，SA、ABA及 MeJA处理均可诱导PtWRKY1基因表达 ，但不同诱导因子对 PtWRKY1表达量的影响存在 一 定差异 ；同时，TMV侵染实验发现外源 PtWRKY1表达能增强转基因烟草抗 TMV 能力，qRT．PCR分析表 明PtWRKY1基因及膜保护性酶 (POD，SOD，CAT)基因均受 TMV诱导而增强表达。本文研究结果可为后续 开展毛 白杨转录因子 PtWRKY1的功能鉴定及应用奠定基础。 关键词 毛 白杨。WRKY转录因子。PtWRKY1，表达分析，抗病性 CharacteristicExpressionAnalysisofTranscriptionFactorGenePtWRKY1 RelatedtoDiseaseResistanceFrom Populustomentosa XiangZheng CaiJian ChenYinlei NiuJun LiuXueping HuHuiwen HouXinyu LinShanzhi CollegeofBiologicalSciencesandBiotechnology，NationalEngineeringLaboratoryforTreeBreeding，KeyLaboratoryofGeneticsandBreedingin ForestTreesandOrnamentalPlnats，MinistryofEducation，BeringForestryUniversity，Beijing，100083 Theauthorscontributedequallytothisarticle Correspondingauthor，linsz2002@163．coln DOI：10．13417／j．gab．033．000853 Abstract R ’，transcriptionfactorsoneofthemostimportantandspecifictranscriptionalregulatoryfactors inplants，participatinginresponsetovariousbioticandabioticstress，morphogenesisandtissuesenescence，has attractedpeople’Sattentions．wRKYtranscriptionfactorgene(designatedasR l，，JN377409)，clonedfrom Populustomentosa，wasusedasthetargetgene，andthestudiesofhtegenegunmediatedonionepidermalcell rtansientexpression ofPtW RKYl—GFP fusion protein．the inducible expression rteated with the signaling moleculesofsalicylicacid(sA)，methyljasmonate(MeJA)orabscisicacid(ABA)，theinoculationassayintrans— genietobaccoplnatswith } Ky genewithtobaccomosaicvirus(TMV)andtheexpressingdetectionofth