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④ 2006年全国博士生学术论坛
杨树抗黑斑病相关基因表达谱分析
张燕梅1张新叶1陈雨辰2潘惠新1王明庥1黄敏仁1
(I南京林业大学林木遗传和基因工程重点实验室。南京210037;
2国家生物芯片工程中心上海生物芯片股份有限公司,上海201203)
摘要:杨树黑斑病是由杨盘二孢菌引起的。是杨属树种主要的病害之一。为了进~步研究杨树抗黑斑病过程中相关
基因的表达情况,从病原菌接种72h后的杨树叶片构建的2个cDNA文库中挑选2952个克隆制定eDNA芯片,分别
取接种4、24、48、72h和7d的叶片RNA为材料,以接种前的叶片RNA为共同对照,采用反转第一链标记方法标
记样本并进行芯片杂交,研究不同接种时间的基因表达谱,结果表明:在接种的最初阶段(4h)有569个克隆被诱
导,其中256个克隆被诱导上调,在随后的几天内,上调克隆数不断增加,72h最多,共501个(72h诱导克隆共865
个),7d被诱导的克隆最少,123个(被诱导克隆260个),在整个过程中,共有1368个克隆被不同程度地诱导上调
或下调,而且病原接种24h和72h诱导强度明显增强,接种7天后,大多数基因都恢复到正常表达水平。根据功能
注释结果,在诱导上调的基因中,最初是与蛋白质合成和转录调控相关基因不断增加,其次是细胞骨架和细胞周期、
蛋白折叠及防御相关基因,最后是信号传导相关基因及大量的功能未知基因,它们通过复杂的相互作用激发植物的
防御反应,从而表现为抗性。以上研究为我们下一步探讨植物抗病机制以及植物、病原相互作用提供了理论基础。
关键词:生物芯片,杨树黑斑病,杨盘二孢菌,表达谱分析
Yuchenz,Pan Minrenl.Microarray
ZhangYanmeil,ZhangXinyel,Chen Hui)【inl,WangMingxiul,Huang Expression
of in toMarssoninabrunnea
Analysespoplarresponse f.sp.Mulagermtubi.
2 Centerfor at
ShanghaiBiochipCo.,LTD.NationalEngineeringBiochipShanghai.201203,China
in toMarssoninabrunnea was for deltoides
Transcriptregulationresponse investigatedPopulus
f.sp.Mu#嘧ermmbi
in 72hinoculated
2952 threetimesslide.fromlibrariesof
cv.‘Lux’(I-69/55)withMicroarraysincludingcDNAs,replicated
10
leaves.Theblack Marssoninabrunnea wasinoculatedafterincubation
Poplar spotdisease,pathogenic f.sp,Multigermtubi
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