大黄酸对α-淀粉酶的抑制机理分析及分子模拟.pdfVIP

现代食品科技 ModernFoodScienceandTechnology 2015，Vo1．31，No．2 大黄酸对 Q一淀粉酶的抑制机理分析及分子模拟 刘华 ’，李仕祥 一，钟业俊 ，吴丹 。 (1．江西科技师范大学生命科学学院，江西南昌330047)(2．南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南 昌 330013)(3．江西省食品药品监督管理局，江西南昌 330029) 摘要：本文应用紫外、荧光、圆二色谱和分子模拟等手段，分析测定了大黄酸对0．【淀粉酶的抑制作用、抑制类型和抑制动力学 常数，探讨了大黄酸对 Cc．淀粉酶二级结构的影响，并通过分子模拟软件对大黄酸和 旺．淀粉酶进行分子对接。结果表明，大黄酸是一 种可逆的竞争型 淀粉酶抑制剂，其半抑制率IC50为0．43~0．02mM，抑制常数 为0．35~0．03rnM；进一步的圆二色谱分析表明， 大黄酸能使a．淀粉酶二级结构含量的变化 (n螺旋含量由12．22％逐渐增加到22．72％，B一折叠含量由43．24％逐渐降低到36．43％)，这 意味着大黄酸能够诱导 淀粉酶的构象发生部分改变；螯合钙离子实验证实了大黄酸能够螯合活性中心的钙离子；分子模拟结果也 表明，大黄酸能够优先结合到 淀粉酶的活性中心，并与催化基团TRP59和TYR62发生相互作用，形成氢键和7c_兀效应，进而与 淀粉竞争活性中心，从而降低了 淀粉酶的催化活性。 关键词：大黄酸； 淀粉酶；抑制作用；二级结构；分子模拟 文章篇号：1673．9078(201512-47．51 DOI：10．13982~／．mfst．1673．9078．2015．2．009 InhibitoryM echanism 0fRJl【ein0nIDE-AmylaseandnsM olecularSimulati0n LIIJHua，LIShi-xiang~ ZHONGYe-jun~，WUDan3 ， (1．SchoolofLifeScience，JiangxiScience TechnologyNormalUniversity,Nanchang330047，China) (2．TheNationalKeyLaboratoryofFoodScience，NanchangUniversiyt,Nanchang330013，China) (3．TheFoodandDrugAdministrationofJiangxiProvince，Nanchang330029，China) Abstract：Theinhibitoryeffect(includinginhibitorymechanism．typenadkineticparameters)ofrhenionn—amylaseandtheeffecton a-amylasesecondarystructurewereinvestigatedbyUV，fluorescence，nadcirculardichroism spectrometry，whilemoleculardockingofrheni nada-ma ylasewasconductedbymolecularsimulation．Theresultsshowedthatrheniwasareversiblenadcompetitiveinhibitortoa-ma ylase． Thehalf-maximalinhibitoryconcentration(IC50)nadinhibitionconstant(髓)were0．43士0．02mMnadO．35士0．03mM，respectively．Circulra dichroism spectraanalysisrevealedhtatrhenicouldalterhtecontentofsecondarystructureina-maylase(gradualincreaseof0-【helixcontent rfom 12．22％ to22．72％nadgradu