小白链霉菌武夷变种HWM DNA的制备及最适酶切条件确定.pdfVIP

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2017-08-08 发布于北京
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小白链霉菌武夷变种HWM DNA的制备及最适酶切条件确定.pdf

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中国农业科技导报 , 2 008, 10 ( S1) : 116 - 119 Jou rna l of A gricu ltu ral Sc ience and Technology 小白链霉菌武夷变种 HWM DNA 的制备及最适酶切条件确定 1 1, 2 1, 3 1 1 王万群 , 　阿拉坦夫 , 　展丽然 , 　石义萍 , 　张克诚 ( 1. 中国农业科学院植物保护研究所 , 北京 1000 94 2. 内蒙古师范大学 , 呼和浩特 010022 3. 河北农业大学 , 河北保定 071001) 摘　要 :为构建小白链霉菌武夷变种 ( St rep tom yces a lbu lu s var. wuy iens is) 的细菌人工染色体 ( b acteria l art ificial chromo som es, BAC) 文库 ,提取了小白链霉菌武夷变种高分子量 DNA ( h igh molecu la r we igh tDNA , HMW 2DNA ) 。 ( ) 用低熔点琼脂糖 low m elting poin t agaro se,LMP 包埋小白链霉菌武夷变种菌丝球 ,胶块经溶菌酶、蛋白酶 K、两种限制性内切酶 ( B am H I、H in d III)处理后 ,使用箝位匀强电场 ( CH EF)凝胶电泳检测 DNA 片段大小。电泳结果显示提取 HWM DNA 完整 ,满足构建 BAC文库的条件 , 确定了最适酶切条件为 H in d III 0. 2 U 酶切 10 m in,为小白链霉菌武夷变种功能基因的研究奠定了基础。关键词 :高分子量 DNA 细菌人工染色体箝位匀强电场电泳中图分类号 : Q7 85　　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : 100 820864 ( 2008) S120116204 Pr epa ra t ion of HM W D NA for S trep tom y ces a lbu lu s va r . w uyien sis an d D eterm ina t ion of th e O p t im um Con d it ion s for R e str ict ion En zym e D ige st ion 1 1 ,2 1, 3 1 1 WAN GW an 2qun , A 2la2tan2fu , ZHAN L i2ran , SH I Yi2p in , ZHAN G Ke2cheng ( 1. Institute of Plan t P rotection, Ch ine se A cadem y of A gr icultural Scienc e s, B eij ing 100094 2. Innermongo lia No rmal Univer sity, Huh