东南景天耐镉相关基因SaFer的克隆与功能初步分析.pdfVIP

浙 江 农 林 大 学 学 报 ，2015，32(1)：25—32 JournalofZhejiangA，University doi：10．118336．issn．2095-0756．2015．01．004 东南景天耐镉相关基因SaFer的克隆与功能初步分析 赵 婷 ，韩小娇 ，刘 明英 ，乔桂荣 ，蒋 晶 ，姜彦成 ，卓仁英 。 (1．新疆大学 生命科学与技术学院，新疆 乌鲁木齐 830046；2．中国林业科学研究院 亚热带林业研究所 ， 浙江 富阳 311400；3．中国林业科学研究院林木遗传育种 国家重点实验室 ，北京 100091) 摘要：铁蛋 白(ferritin)是一种专门存储铁的重要胁迫相关蛋白，参与镉 离子吸收的调控。从构建的东南景天Sedum aflrediicDNA文库中筛选出东南景天Ferritin基因cDNA全长，命名为SaFer，编码序列为 1ll7bp，开放阅读框为 759bp，编码 252个氨基酸。以东南景天基 因组 DNA为模板分离到 r基 因组序列 ，长度为 1702bp，含有 7个 内含子。氨基酸序列同源性分析表明：SaFer与苹果Ma／usdomesticaFerritin亲缘关系最近 ，同源性高达 76％。实时 荧光定量聚合酶链式反应 (qRT-PCR)分析发现 ：根系中 r基 因在镉胁迫 12h后表达显著上调 。镉胁迫实验显 示。转基因拟南芥Arabidopsisthoiiana比野生型有更高的耐镉胁迫能力。SaFer基 因的分离及其初步功能验证为研 究东南景天耐镉机制和林木耐镉转基因育种提供 了理论依据。图9表 1参23 关键词：植物学；东南景天 ；铁蛋 白(ferritin)；镉胁迫；表达分析 中图分类号：$718．3；Q943．2 文献标志码 ：A 文章编号：2095—0756(2015)01—0025—08 IIssoollaattiioonnaannddexpIressionooftaccaaddmmiiuumm-rreessiisstta,ntgene((SSaaFFeerr) fromSedumalfredii ZHAOTing ，HANXiaojiao，LIUMingyin~，QIAOGuirong2~，JIANGJing， JIANGYancheng，ZHUORenying~ (1．DepartmentofBiologyandTechnoloyg，XinjiangUniversity，Urumqi830046，Xinjiang，China；2．TheResearch InstituteofSubtropicalForestry，ChineseAcademyofForestry，Fuyang311400，Zhejiang，China；3．StateKey LaboratoryofTreeGeneticsandBreeding，ChineseAcademyofForestry，Beijing100091，China) Abstract：AbioticstresswasaSeriousproblem thataffectplantsgrowthandproducts．Inplants，ferritinisa specialironstorageproteincloselyrelatedtostress．AcDNAfromtheSedumalfrediicDNAlibrary，designated a8SaFer，wasisolatedand analyzedbyhomologousanalysisand by Real—TimeReverseTranscription—PCR (qRT-PCR)．Then，cadmium—stressexperimentswereconductedtocomparetransgenicArabidopsisthaliana overexpressedSaFertoawildtype．ResultsshowedthatSaFercDNAwas1117bplongwithanopeningread- ingframe (ORF)of759bp．TheORFofSaFerencodedapolypeptideof25