应用新型液相色谱柱去除蜂蜜中呋喃唑酮代谢物的基质干扰.pdfVIP

201l食品安全技术与标准国际研讨会暨AOAC中国区会议论文集 应用新型液相色谱柱去除蜂蜜中呋喃唑酮代谢物的基质干扰 高洋洋李晶刘鑫张杉何悦崔凤云关旭张朝晖‘ (北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心食品实验室，北京市朝阳区甜水园街6号，100026) 摘要：采用高效液相色谱一串联质谱法(HPLC．MS／MS)检测了蜂蜜中呋喃唑酮代谢物残留。样品经盐酸溶液水解和 2一硝基苯甲醛衍生后，调节pH值至中性，用OasisHLB固相萃取柱净化，甲醇一水一甲酸溶液(10：90：O．1％)溶解并 mm Poroshell120 定容，再分别通过50×2．1 C18短柱及Agilent SB．C18长柱进行液相色谱柱分离，用电喷雾电离 mm (ESI)串联四极杆质谱仪以选择反应监测扫描模式(SRM)进行检测分析。结果表明，经50×2．1C18短柱检测后 Poroshell120 发现样品疑似阳性，更换Agilent SB-C18长柱后，疑似阳性蜂蜜的基质杂峰与标准物质峰分离，达到 了排除假阳性干扰的目的。 Pomshell 关键词：HPLC．MS／MS：Agilent120：呋喃唑酮代谢物；蜂蜜 l 引 言 硝基呋喃类药物为广谱抗生素，对革兰氏阳性及阴性菌均有一定抗菌作用。由于呋喃价格低廉且治疗效 果好，所以广泛应用于家禽、家畜、水产品的痢疾、肠炎、球虫病的预防和治疗消化道疾病【I捌。但由于硝基 呋喃类药物及其代谢物具有相当的毒性及致畸胎作用，且能诱发癌症，因此，欧盟和美国分别在1995年和2002 年全面禁止将硝基呋喃类药物用于食源性动物。2002年3月，我国农业部第193号公告也将硝基呋喃类抗菌剂 呋喃类代谢物残留的限量要求，因此，对蜂蜜中硝基呋喃类代谢物残留的检测也成为了出口蜂蜜的必检项目 之一。 目前，高效液相色谱．串联质谱联用技术(LC．MS／MS)己成为测定动物组织中硝基呋喃类代谢物的残留 的常规方法【4’51。对蜂蜜中硝基呋喃类代谢物的检测采用的是与动物组织中硝基呋喃类代谢物相同的检测方 法，但由于蜂蜜样品的基质较动物组织的基质更为复杂，因此，应用常规方法对蜂蜜中硝基呋喃类代谢物的 检测中有时会出现假阳性现象f6】，容易造成误判。本实验中采用了安捷伦公司的Poroshell120系列表面多孔层 色谱柱，该柱具有柱子长、低反压，高柱效的特点，实现了对假阳性蜂蜜的基质杂峰与标准物质峰的分离。 2实验部分 2．1仪器与试剂 高效液相色谱串联质谱仪为ThermoACCELA+TSQQUANTUM 级)、乙酸乙酯(HPLC级)；水由Milli．Q Dr．Ehrenstorfer)、呋喃唑酮同位素内标AOZ—D4(纯度均99％，WITEGA)。市售蜂蜜。 2．2标准溶液的配制 称取适量呋喃唑酮标准物质用甲醇稀释成1．0mg／mL标准储备液，吸取适量的标准储备液用甲醇稀释成 10rtg／mL的标准中间液，吸取适量的标准中间液用甲醇稀释成0．2pg／mL的标准工作液，．18℃避光条件下 保存。 称取适量呋喃唑酮内标标准物质用甲醇稀释成1．0mg／mL标准储备液，吸取适量的标准储备液用甲醇稀 释成为10 I-tg／mL的标准中间液，吸取适量的标准中间液用甲醇稀释成O．2pg／mL的标准工作液，．18℃避光 条件下保存。 一170一 201l食品安全技术与标准国际研讨会暨AOAC中国区会议论文集 移取适量标准工作液，按照样品操作步骤同步操作，使最终样液中呋喃唑酮标准物质的浓度分别为0 neCrrlL，5 ng／mL，30 n舭，2．5 ng／mL，10ng／rr儿，20 ng／mL，50ng／n_lL。 2．3色谱．质谱条件 Poroshdl120 mlTli．d．×100 rmnol乙酸铵 采用Agilent SB．C18柱(4